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肺癌细胞株:MSTO-211H

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所  在  地上海市

更新时间:2022-05-06 14:19:31浏览次数:128次

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货号 GOY-01X0162
肺癌细胞株:MSTO-211H 公司正在出售的产品:1g 潮 B Hygromycin B 4℃保存50T 蓝舌病毒PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存5mL 成纤维细胞生长因子-2 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存25mL Agarose Gel Loading Buffer-Glycero (甘油型上样液),6X Agarose Gel L

公司细胞现货供应,质量有保证、*、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

产品名称

肺癌细胞株:MSTO-211H 

规格

1×10⁶cells/T25培养瓶

分类

细胞系

货号

GOY-01X0162

商品介绍:

名称 肺癌细胞株:MSTO-211H 

别称MSTO-211 H; MSTO211H; MSTO-211; 211H

种属人类

年龄(性别)男性,62

组织来源二相间皮瘤肺转移灶

生长特性贴壁细胞

细胞形态成纤维细胞样

背景描述MSTO-211H细胞是于1985年从一位肺二相间皮瘤患者的胸水中建株的,这个病人接受过多种药物联合前期化疗。MSTO-211H细胞具有高亲和力的EGF结合位点,并表达神经元特异性烯醇酶(NSE)及人绒毛膜素(HCG)αβ亚基;未检测到胺脱羧酶(DDC)、邦巴辛与神经TensinMSTO-211H细胞过表达c-myc原癌基因,并没有观察到基因重排或扩增。MSTO-211H细胞V-srcv-ablv-erbBc-raf1Ha-rasKi-rasN-ras的表达呈阳性;未检测到N-mycL-mycc-mybc-fosv-fesv-fmsv-sis癌基因的表达。MSTO-211H细胞的饱和浓度能达到4×10^5/cm^2,但达到这个浓度时就会从表面脱落。

生物安全等级1

生长培养基RPMI-164010% FBS1% P/S

推荐传代比例1:3-1:4

推荐换液频率2~3/

倍增时间~30-40小时

冻存条件

冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度:液氮

培养条件

气相:空气,95%CO25%

温度:37℃

致瘤性Yes, tumors for med in approximately 20% of nude mice inoculated with MSTO-211H cells.

使用方法:

收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。

2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

3. 细胞传代

1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2) 添加0.125%消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入*培养液终止消化;

3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;

4) 待细胞*贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。

 

培养操作:

1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;

1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
图片13.jpg

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

大鼠 GFRA1 基因全长ORF克隆

大鼠 GM-CSF 基因全长ORF克隆

大鼠 CNTFR 基因全长ORF克隆

大鼠 FCGR2B / CD32b 基因全长ORF克隆

大鼠 FCGR3A / CD16a 基因全长ORF克隆

大鼠 CD64 / FCGR1 基因全长ORF克隆

大鼠 FCGR2A / CD32a 基因全长ORF克隆

大鼠 CD89 / FCAR 基因全长ORF克隆

大鼠 DLL1 基因全长ORF克隆

大鼠 CNTF 基因全长ORF克隆

肺癌细胞株:MSTO-211H RASSF1A  Ras相关区域家族1A抗体 规格: 0.1ml

CDCREL/SEPT5  细胞周期调控相关蛋白1 规格: 0.2mlRabbit Anti-Monkey IgM  兔抗猴IgM 规格: 1mg

Mouse Anti-rat IgG/AP  碱性磷酸(AP)标记的小鼠抗大鼠IgG 规格: 0.1ml

MIG7  富含半蛋白质MIG7抗体 规格: 0.2ml

JIP1/MAPK8IP1  丝裂原活化蛋白激8相互作用蛋白1 规格: 0.2ml

ErbB-3/HER3  表皮生因子受体3抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-human IgG/PE-CY5  PE-CY5标记的兔抗人IgG 规格: 0.1ml

phospho-Rab24(Ser95)  磷酸化ras基因相关蛋白Rab24抗体 规格: 0.1ml

500mL Zymogram Developing Buffer,10X  Zymogram Developing Buffer,10X  常温保存

100mL DNA 包被溶液 DNA Coating Solution -20℃保存

2 ug pcDNA4/HisMax B pcDNA4/HisMax B 低温运输,-20℃保存

MEI培养基 MEI Medium 1000ml

 


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