NAD激酶（NADK）可见分光光度法检测试剂盒 返回列表页

操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。

商品属性：

商品介绍：

测定意义

NADK（EC 2.7.1.23）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是目前所发现的生物体内惟一能够催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶，可催化NAD(H)以ATP或无机多聚磷酸[poly(P)]作为磷酰基供体进行磷酸化反应，生成NADP(H)。因此，NAD激酶在合成NADP(H)以及调节NAD(H)与NADP(H)的平衡上具有重要作用。

测定原理：

NADK催化NAD+磷酸化，生成NADP+；NADP+可被6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原为NADPH；NADPH通过PMS的递氢作用，还原氧化型噻唑蓝（MTT），通过在600 nm下测定MTT的还原速度（吸光值的变化）可反映出NADK活性的大小。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。

实验方法学：

选择抗凝的注意点：

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

茜素绿 Dye content 95%(R)-1-Boc-3-羟基吡咯烷  98% Anti-Polyprotein (Hepatitis G Virus)  庚型肝炎病多聚蛋白抗体

灿烂绿 高纯级,95%2-(1-基)苯 97%Anti-ZEBRA  人类疱疹病4抗体

铋试剂Ⅰ 97%喹唑啉 98%Anti-membrane glycoprotein E(VZV)  人水痘带状疱疹病gE蛋白抗体

铋试剂II CP三氟磺酸钪 98%Anti-HHV8/ORF K2  类疱疹病8抗体

铋试剂II 98%四氢-2 2-二甲基-4H--4-酮 95%Anti-HHV8/ORF50  人类疱疹病8抗体

考马斯亮蓝G250 AR三(4-溴苯基) 98%Anti-HHV8/ORF50  人类疱疹病8抗体

考马斯亮蓝G250 AR，无蛋白2-甲酰基噻唑 97%Anti-HHV8/ORF50  人类疱疹病8抗体

考马斯亮蓝G250 70%，用于电泳500ml透气不透液垫片 40mm口径 配套42mm口径盖Anti-HHV8/ORF K2  人类疱疹病8抗体

NAD激酶（NADK）可见分光光度法检测试剂盒

酵母DNAout（见关联产品）

溶壁酶（破壁酶）干粉

蜗牛酶干粉

消解酶（溶细胞酶）干粉

真菌DNAout

柱式真菌DNAout

细胞器DNA提取

丝状真菌线粒体DNAout

线状DNA清除剂

柱式动物线粒体DNAout，PCR级

柱式动物线粒体DNAout，测序级

柱式昆虫mtDNAout，测序级（停产）

柱式血液mtDNAout，测序级（见关联产品）

柱式植物mtDNAout，测序级（见关联产品）

柱式植物叶绿体DNAout

细菌DNA提取

Southern级细菌（G+）DNAout（见关联产品）

Southern级细菌（G-）DNAout（见关联产品）

百万碱基级细菌（G+）DNAout（见关联产品）

百万碱基级细菌（G-）DNAout（见关联产品）

大提柱式土壤DNAout

大提柱式细菌DNAout