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实验中细胞爬片的免疫荧光操作步骤

时间:2017/6/13阅读:2011
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1.取出ATCC细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。
 注意:有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心,注意 反正面,放在皿里洗比较方便,避免了来回夹取,另外洗的时候加PBS不要太冲,不要细胞冲下来。洗的时候我都是多加PBS,稍晃一下就倒掉,没有等5分钟或10分钟。
2. 4%冷的多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍。
3. 0.2%Triton X-100通透10分钟,PBS洗三遍。
4. 与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,PBS洗三遍。
5. 一抗4度湿盒内过夜,也可37度2小时,感觉前者效果好,PBS洗三遍。
6.二抗室温2小时(避光),或者37度1半小时,PBS洗三遍。
7.用DAPI染核,然后直接照荧光片。
8.蒸馏水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周,因为甘油不象树脂那样会干,所以不用指甲油封的话会弄的一塌糊涂。
人成纤维细胞-新生儿cDNA    英文名称:    HDF-n cDNA    ATCC细胞规格:    20 reactions        
人成纤维细胞-成人cDNA    英文名称:    HDF-a cDNA    规格:    20 reactions        
人生发基质细胞cDNA    英文名称:    HHGMC cDNA    规格:    20 reactions        
      
人淋巴内皮细胞cDNA    英文名称:    HLEC cDNA    规格:    20 reactions        
人淋巴成纤维细胞cDNA    英文名称:    HLF cDNA    规格:    20 reactions        
人口腔角质细胞cDNA    英文名称:    HOK cDNA    规格:    20 reactions        
人牙龈成纤维细胞cDNA    英文名称:    HGF cDNA    规格:    20 reactions        
人牙周膜成纤维细胞cDNA    英文名称:    HPLF cDNA    规格:    20 reactions        
人食道上皮细胞cDNA    英文名称:    HEEpiC cDNA    规格:    20 reactions        
人食道平滑肌细胞cDNA    英文名称:    HESMC cDNA    规格:    20 reactions        
人肠微血管内皮细胞cDNA    英文名称:    HIMEC cDNA    规格:    20 reactions        
人肠平滑肌细胞cDNA    英文名称:    HISMC cDNA    规格:    20 reactions        
人结肠平滑肌细胞cDNA    英文名称:    HCSMC cDNA    规格:    20 reactions        
人肺微血管内皮细胞cDNA    英文名称:    HPMEC cDNA    规格:    20 reactions ATCC细胞       

 

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