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分析干细胞周期的操作步骤

时间:2017/5/16阅读:232
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Ⅰ、干细胞样品准备

准备以下一种或几种样品

A、组织单细胞悬浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞)

B、组织培养细胞

C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞

Ⅱ、干细胞反应体系-DNA低渗缓冲液

柠檬酸三钠 0.25g Triton-X 100 0.75ml Propidium iodide 0.025g

核糖核酸酶 0.005g

蒸馏水 250ml

我们将该DNA低渗溶液于密闭瓶子中存放数月后并无发现有任何染色活性的丢失

Ⅲ、染色

1、 每一个管子中放入1×106个细胞;

2、 样品离心后尽可能*地移去上清液,并且不要打碎沉淀块;

3、 入1ml的DNA低渗染色缓冲液至沉淀中,并混匀;

4、 样品于4℃下避光30分钟或zui长不超过1个小时以备流式干细胞仪分析。

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