兔食管上皮干细胞培养步骤

干细胞实验材料：
      1. 大兔的正常食管组织
      2. 6孔培养板：用多聚赖氨酸4℃包被过夜
      3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L*、200mg/L*和200000U/L*，pH7.4
      4. *、解剖剪、解剖镊、眼科剪，*
 
      实验方法：
      1. 处死大兔，取正常食管组织放入含双抗的PBS（pH=7.2）中反复清洗3次，以洗去组织表面的血丝及粘液；
      2. 小心的用眼科剪镊将食管黏膜与黏膜下组织分离；
      3. 分离出的粘膜组织用含双抗的PBS（pH=7.2）反复冲洗若干次；
      4. 将清洗后食管黏膜*成1mm3 左右大小的组织块；
      5. 再次用含双抗的PBS（pH=7.2）反复清洗，直至清洗液清亮为止；
      6. 将黏膜组织块按1块/cm2 的密度接种于6孔培养板中，上皮面朝下；
      7. 将贴满组织块的培养板室温放置5~10分钟，待组织块贴壁后，转入37℃、5%CO2 的培养箱中静置培养。
      8. 静置2h左右，待组织块基本不会浮起后，加入0.5-1ml培养液，置于37℃、5%CO2 的培养箱中继续培养。3-4天后有上皮干细胞从组织边缘爬出，7天左右铺满板面。
人转*酶2C多肽(TGM2)ELISA试剂盒    进口/分装    human tranGSlutaminase 2C polypeptide，TGM2 ELISA Kit                                        
人Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)ELISA试剂盒    进口/分装    Human procollagen Ⅰ N-terminal peptide，PⅠNP ELISA Kit                                        
人Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type Ⅰ collagen，ⅠCTP ELISA Kit                                        
人Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒    进口/分装    Human C-opeptide of type Ⅰ collagen，CTX-Ⅰ ELISA Kit                                        
人肝脂酶(HL)ELISA试剂盒    进口/分装    Human hepatic lipase，HL ELISA Kit                                        
人乙酰肝素酶(HPA)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Heparanase，HPA ELISA Kit                                        
人Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA试剂盒     进口/分装    Human type Ⅱ collagen helical peptide，HELIX-ⅡELISA Kit  
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