人源细胞培养的注意事项大总结

人源细胞在单纯的基础培养基中不能存活，在特殊类型的细胞培养中必须提供某些痕量营养物质及生长因子才能使细胞得以生长并维持生长状态。基础培养基常常要添加血清，血清终浓度多为5~20%。特殊用途的血清来源须用经验确定，广泛应用的血清种类有马血清与胎牛血清。胎牛血清中富含有丝分裂因子，常选其作增殖细胞用的血清，也用于细胞系和原代培养。而马血清常常用来作有丝分裂后的神经元培养。然而，很多人也将胎牛血清用于神经元培养，也有人用马血清来培养胶质细胞。用大鼠进行神经元培养的某些研究者喜欢使用同型血清;人类的胎盘血清，亦曾用于神经组织的器官类型的培养，也用在一些特殊培养种类中。

血清的不同批号含有不同的成分，所以许多人发现，应该在使用前对血清进行测试。大多数试剂商提供样品，所满意的批号即可选用，这样可以一次得到足够一年用量的血清，血清在使用前通常在56℃加热30分钟，这一过程称为灭活。

1979年神经细胞培养出现了一个重要进展，用化学添加剂即可维持神经细胞存活与生长而不需要在培养基中添加血清。其工作基础是用合适的激素、营养物和促贴壁的物质的组合置换培养基中的成分，zui后找到了适合大多数细胞培养的试剂配方，该配方称为N2，专门用于神经细胞培养，zui早是用在B104大鼠神经母细胞瘤细胞系的培养。它的基础培养基是1：1的DMEM与H12的混合液，添加了胰岛素、转铁蛋白、腐胺和硒。胰岛素和胰岛素样生长因子对于大多数类型细胞的存活和生长有重要作用，硒是*产生的合作因子，可能有助于过氧化物和超氧化物的水解，有报道说还能防止细胞的光照损伤。随后的其他配方如N1N3则含有较低浓度的转铁蛋白。

未料到的是上述配方构成的培养基可以支持神经母细胞瘤细胞系快速增殖，随后又发展了能支持原代培养的各种神经元生长的培养基，这种培养基在许多实验室里已取代了有血清培养。人源细胞在某些培养方案中，细胞直接进入无血清培养，这样的培养基可以消除来自血清的不均一性。更为重要的是，它们可用来检测生长因子以及其他促进神经元存活或生长的因子，或者用来检测那些可保护神经元免遭环境毒物损伤的制剂。于神经元的培养基在某些培养环境中还可以减低非神经元细胞的增殖，故可使神经元纯化。

[Tyr9]- β-促黑激素 (猪)    英文名称：    [Tyr9]- β-MSH (porcine)    质量规格：    >95%,BR            号：    198281-81-1     
[Val5]-血管紧张素 II 醋酸盐水合物    英文名称：    [Val5]-Angiotensin II acetate salt hydrate     质量规格：    美国进口            号：    58-49-1 (non-salt)    
?8,9-脱氢雌激素酮 3-硫酸钠盐    英文名称：    ?8,9-Dehydro Estrone 3-Sulfate Sodium Salt    质量规格：    美国进口            号：    61612-83-7    
1-(10,12-二十五碳二炔基)溴化吡啶鎓    英文名称：    1-(10,12-Pentacosadiynyl)pyridinium Bromide    质量规格：                号：    94598-31-9    
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