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配制人源细胞的基本要素

时间:2018/1/16阅读:171
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当重要的人源细胞培养污染时,研究者可能试图消除或控制污染。首先,确定污染物是细菌、真菌、支原体或酵母,把污染细胞与其它细胞系隔离开,用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台,检查HEPA过滤器。
        高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性,因而,做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗生素如*和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是推荐的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤。
        ①在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。
        ②分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗生素加入到每一个孔中。例如,*推荐下列浓度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。
        ③每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。
        ④确定抗生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2-3倍浓度的抗生素的培养液培养细胞2-3代。
        ⑤在无抗生素的培养基中培养细胞一代。
        ⑥重复步骤4。
        ⑦人源细胞在无抗生素的培养基中培养4-6代,确定污染是否以已被消除。
67-56-1     Methyl Alcohol     甲醇标准品    3x1.5ml
111-42-2    Diethanolamine    二乙醇胺标准品    3ml
102-71-6         三乙醇胺标准品    3ml
        曲沃前列素标准品    3ml
        帕立骨化醇溶液标准品    3ml
134-62-3    Diethyltoluamide    避蚊胺标准品    3g
8031-42-3    Digitalis    洋地黄标准品    3g
67-68-5    Dimethyl Sulfoxide    二甲基亚砜标准品    3g
868-14-4     Potassium Bitartrate (AS)    酒石酸氢钾标准品    3g
144-55-8     Sodium Bicarbonate (AS)    *标准品    3g
100986-89-8        左*相关物质B标准品    35mg
人源细胞

 

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