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干细胞保藏材料及方法

时间:2018/1/25阅读:208
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干细胞保藏材料有以下几种:

1. 明胶片

为建立一种保存菌种时间长、使用 方便,便于基层推广应用的菌种保藏方法.采用明胶片干燥保藏法观察了1979-1988年分 离到的沙门菌和志贺菌118株菌种保藏效果 。 采用明胶片菌种保藏法保存了标准菌种ATCC26003*和ATCC27853绿脓杆菌.2005-2009连续5年,通过每年的传代鉴定,菌种的存活率100.0%且各项生化特性保存完好未发生变异或丢失。保藏者认为该方法保存菌种时间长、使用方便又不需要昂贵的仪器设备,是一种特别适用于基层推广应用的菌种保藏方法 。

2. 滤纸片

滤纸片法低温冷冻保存菌种的方法 研究邓晓丽体会到在微生物检验工作中菌种的保存是一项重要工作,对于菌株的分析研究,传染性疾病的朔源追踪,药物的抑菌试验等都有着重要意义。她根据工作条件采用干燥滤纸片低温冷冻保 存菌种的方法,分别将保存半年、 1年、2年的菌株进行复苏鉴定,认为保藏效果良好 。实验室保存菌种的方法很多,有些方法简单易行, 不需要特殊设备,但经常移植菌种易发生变异或污染杂菌,又增加工作强度;有些需要冷冻干燥机、 真空泵,全自动化生物分析仪等特殊设备。她们采用干燥滤纸片低温冷冻保存菌种, 2年后将菌种复苏进行鉴定,取得理想效果 。

3. 牛乳

一种简便、实用、 并能较长期保存菌种方法,更好地为教学、科 研提供标准菌株。将复苏的29种细菌菌种,接种于经鉴定无污染者的无菌新鲜牛乳中,置普通冰箱冷冻室-20℃低温保存,并定期复苏进行鉴定。结果显示所有菌种一次接种可保存3年以上,通过对细菌存活情况、形态、染色、生化特性及血清学试验观察和鉴定等与初始鉴定结果一致。新鲜牛乳保存菌种法保存菌种效果可靠,而且不须反复传代,不需特殊设备,是一种操作简 便、易于推广的保存菌种新方法 。

分别采用斜面低温法、半固体穿刺法、液体石蜡法、脱脂牛奶低温冻存法、冷冻干燥保存法进行研究,考察各方法保存后菌的存活时间和存活率。结果用斜面低温法、半固体穿刺法保藏6个月时菌种存活率在80%以上,但随后菌种迅速死亡存活率降低至0;液体石蜡法可保藏9~12个月.用脱脂牛奶低温冻存法保藏的菌种在2年后存活率仍达97.9%,且菌种的形态、生理特征基本未变。

干细胞冷冻干燥保存2年后存活率100.0%。试验结果显示脱脂牛奶低温冻存法优于斜面低温法、半固体穿刺法等常规菌种保存法,保存2年后菌株存活率与冻干法比较无显著差异,且比冻干法操作简便,更容易开展 。
 β-抑制蛋白1IgG    小鼠抗甲状腺过氧化物酶(TPO-Ab) 
 β-抑制蛋白2IgG    小鼠抗肌内膜IgA(EMA IgA)
 γ1氨基丁酸受体β1IgG    小鼠抗红(RBC) 
 γ1氨基丁酸受体β1IgG    小鼠抗核膜糖蛋白210(gp210) 
 γ干扰素诱导单核细胞因子IgG    小鼠抗核(ANA) 
 γ干扰素诱导蛋白16IgG    小鼠抗单链DNA/变性DNA(ssDNA) 
 γ-连环蛋白(γ-γ链接素)IgG    小鼠抗单链DNA/变性DNA(ssDNA) 
 λ轻链IgG    小鼠抗单核(AMA)
 阿片样物质结合蛋白/细胞粘附分子样蛋白IgG    小鼠抗促甲状腺素受体(TRAb)
干细胞

 

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