LBA4404 电击感受态细胞 50ul*10-生命科学仪器 返回列表页

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培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作方法：
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。

 GAP 人GTP酶活化蛋白 规格： 48T/96T

 Flt-3L 人FMS样*激酶3配体 规格： 48T/96T

 Flt3 人FMS样*激酶3 规格： 48T/96T

 E-Selectin/CD62E 人E选择素 规格： 48T/96T

 E-Cad 人E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白 规格： 48T/96T

 EJ/GlyRS 人EJ抗体/抗甘氨酰tRNA合成酶抗体 规格： 48T/96T

 D2D 人D二聚体 规格： 48T/96T

 D2D 人D二聚体 规格： 48T/96T

 DBP 人DNA结合蛋白 规格： 48T/96T

 DKK1 人Dickkopf 1 规格： 48T/96T

 CNP 人C型钠尿肽 规格： 48T/96T

 C-Peptide 人C肽 规格： 48T/96T

 CRP 人C反应蛋白 规格： 48T/96T

LBA4404 电击感受态细胞 50ul*10 CP 人C多肽 规格： 48T/96T

 CXCR3 人CXC趋化因子受体3 规格： 48T/96T

 CXCR1 人CXC趋化因子受体1 规格： 48T/96T

 CX3CR1 人CX3C趋化因子受体1 规格： 48T/96T

人c-sis ELISA Kit，48T/96T 人c-sis ELISA Kit，48T/96T 规格： 48T/96T

人c-sis ELISA Kit，48T/96T 人c-sis ELISA Kit，48T/96T 规格： 48T/96T

 c-myc 人c-myc癌基因产物 规格： 48T/96T

人c-myc ELISA Kit，48T/96T 人c-myc ELISA

hì jì PUC19 容量： RT 1克

shēng huà shì jì PUC18 容量： RT 1克

shēng huà shì jì PNB(对硝基苯甲酸) 容量： 1米

shēng huà shì jì PLET琼脂基础 容量： 25克

shēng huà shì jì PH试纸 容量：

shēng huà shì jì Pfu酶 容量： 2～8℃，避光 1克

shēng huà shì jì PEA琼脂 容量： 10张/盒

shēng huà shì jì PCR纯化Kit 容量： 1公斤

shēng huà shì jì PBS缓冲液 容量： 保存：-20℃ 50次/250ul/支

shēng huà shì jì PALCAM添加剂 容量： 1米

shēng huà shì jì PALCAM琼脂 容量： 100克

shēng huà shì jì O-乙酰-L-*盐酸盐 容量： 1公斤

shēng huà shì jì O-苯并三氮唑-N，N，N，N-四甲脲四氟硼酸酯 容量： 100克

shēng huà shì jì O-苯并三氮唑-N，N，N，N，-四甲脲六氟磷酸酯 容量： 1公斤

shēng huà shì jì Olig(Dt)15 容量： RT 25克

shēng huà shì jì OGY琼脂 容量： 5克

shēng huà shì jì OED60K型发酵工业通用消泡剂 容量： 1公斤

shēng huà shì jì OED24K型酶制剂、抗生素发酵工业消泡剂 容量： 1克

shēng huà shì jì ?33mm水系滤器 容量： 保存：-20℃ 500U

Kit，48T/96T 规格： 48T/96T

注意事项:

1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤：
1．取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100        μl感受态细胞能够被1         ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3．42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟
4．每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
 5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。