AGL1 电击感受态细胞 50ul*50-生命科学仪器 返回列表页

购买客户请先与我司细胞销售人员核实订购的产品名称、种属、货号、数量、协商细胞价格并预约发货期与提取方式。向销售人员索取细胞说明书并认真阅读以方便你的实验操作。产品仅用于科研

培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作方法：
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。

 PARC/CCL18 人肺部活化调节趋化因子 规格： 48T/96T

 SP-D 人肺表面活性物质相关蛋白D 规格： 48T/96T

 SP-C 人肺表面活性物质相关蛋白C 规格： 48T/96T

 SP-B 人肺表面活性物质相关蛋白B 规格： 48T/96T

 SP-A 人肺表面活性物质相关蛋白A 规格： 48T/96T

人肺癌标志物ELISA Kit，48T/96T 人肺癌标志物ELISA Kit，48T/96T 规格： 48T/96T

 DR-70TM 人肺癌标志物DR-70 规格： 48T/96T

 LTA 人非小细胞肺癌抗原 规格： 48T/96T

 NNE 人非神经元性烯醇化酶 规格： 48T/96T

 NON 人非甲基化寡核苷酸 规格： 48T/96T

 AhR 人芳香烃受体 规格： 48T/96T

AGL1 电击感受态细胞 50ul*50 E1/UBAE 人泛素激活酶 规格： 48T/96T

 Ub 人泛素蛋白 规格： 48T/96T

 rT3 人反三碘甲状腺原氨酸 规格： 48T/96T

 DNM2 人发动蛋白 规格： 48T/96T

 DPPⅣ 人二肽基肽酶Ⅳ 规格： 48T/96T

人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶2家族肽B4 人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶2家族肽B4 规格： 48T/96T

 SLC/CCL21 人二级淋巴组织趋化因子 规格：

shēng huà shì jì β-乳球蛋白 容量： 5克

shēng huà shì jì β-巯基乙醇 容量： 25克

shēng huà shì jì β-葡萄糖醛酸苷酶测试盒 容量： RT 500支/盒

shēng huà shì jì β-葡萄糖苷酸酶 容量： 100克

shēng huà shì jì β-葡萄糖苷酶 容量： 保存：-20℃ 1毫克

shēng huà shì jì β-葡聚糖酶 容量： 500毫克

shēng huà shì jì β-萘乙酸 容量： RT 100克

shēng huà shì jì β-环糊精 容量： 100克

shēng huà shì jì β-甘油磷酸二钠五水物 容量： 50毫克

shēng huà shì jì β-甘油磷酸二钠水合物 容量： 保存：-20℃ 100毫克

shēng huà shì jì β-* 容量： RT 1克

shēng huà shì jì β-*乙酯盐酸盐 容量： RT 10克

shēng huà shì jì β-*甲酯盐酸盐 容量： RT 10克

shēng huà shì jì β-半乳糖苷酶 容量： RT 1克

shēng huà shì jì β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶测试盒 容量： RT

48T/96T

 DAO 人二胺氧化酶 规格： 48T/96T

注意事项:

1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤：
1．取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100        μl感受态细胞能够被1         ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3．42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟
4．每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
 5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。