LBA4404 感受态细胞 100ul*10-生命科学仪器 返回列表页

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培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作方法：
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。

 Big ET 人大内皮素 规格： 48T/96T

 Big ET 人大内皮素 规格： 48T/96T

 colicin 人大肠菌素 规格： 48T/96T

 CCSA-4 人大肠癌专一抗原4 规格： 48T/96T

 CCSA-3 人大肠癌专一抗原3 规格： 48T/96T

 CCSA-2 人大肠癌专一抗原2 规格： 48T/96T

 PRL 人催乳素 规格： 48T/96T

 MF/MPF 人促有丝分裂因子 规格： 48T/96T

 GnRH 人*释放激素 规格： 48T/96T

 DSIP 人促睡眠肽 规格： 48T/96T

 GHRH 人促生长激素释放激素 规格： 48T/96T

LBA4404 感受态细胞 100ul*10 ACTH 人促肾上腺皮质激素 规格： 48T/96T

 CRH 人促肾上皮质激素释放激素 规格： 48T/96T

 FSH 人促卵泡素 规格： 48T/96T

 TRH 人促甲状腺素释放激素 规格： 48T/96T

 TSH 人促甲状腺素 规格： 48T/96T

 TSHR 人促甲状腺激素受体抗体 规格： 48T/96T

 LH * 规格： 48T/96T

人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3 规格： 48T/96T

 E3 人雌三醇 规格： 48T/96T

 E 人雌激素 规格： 48T/96T

 ER 人雌二醇受体 规格： 4

shēng h

shēng huà shì jì TCH(噻吩-2-羧酸酰肼) 容量： 1米

shēng huà shì jì TCBS琼脂平板 容量： 1米

shēng huà shì jì TBX培养基 容量： 100张/盒

shēng huà shì jì TBB培养基 容量： 25克

shēng huà shì jì TAT肉汤 容量： 2～8℃ 25毫升

shēng huà shì jì Taq酶 容量： 100克

shēng huà shì jì Taq plus酶 容量： 1公斤

shēng huà shì jì T7 RNA聚合酶 容量： 2～8℃ 1克

shēng huà shì jì T7 DNA聚合酶 容量： 2～8℃，避光 1克

shēng huà shì jì T4 RNA连接酶 容量： 5克

shēng huà shì jì T4 DNA连接酶 容量： 保存：-20℃ 100毫克

shēng huà shì jì T4 DNA聚合酶 容量： 5克

shēng huà shì jì T3 RNA聚合酶 容量： 2～8℃ 5克

shēng huà shì jì T1NO肉汤 容量： 2～8℃ 150毫升

shēng huà shì jì T1N3肉汤 容量： 2～8℃ 150毫升

8T/96T

注意事项:

1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤：
1．取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100        μl感受态细胞能够被1         ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3．42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟
4．每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
 5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。