当前位置:上海莼试生物技术有限公司>>感受态细胞>>根癌农杆菌感受态细胞>> GV3101(pSoup-19) 感受态细胞 100ul*10-生命科学仪器
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产品名称 | GV3101(pSoup-19) 感受态细胞 100ul*10 |
包装 | 100ul*10 |
分类 | 表达感受态细胞 |
培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作方法:
1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
sCD40L 人可溶性白细胞分化抗原40配体 规格: 48T/96T
sCD30L 人可溶性白细胞分化抗原30配体 规格: 48T/96T
sCD28 人可溶性白细胞分化抗原28 规格: 48T/96T
sP-selectin 人可溶性P选择素 规格: 48T/96T
sE-selectin 人可溶性E选择素 规格: 48T/96T
ENG/sCD105 人可溶性Endoglin 规格: 48T/96T
sCD44-v9 人可溶性CD44变体9 规格: 48T/96T
sCD146 人可溶性CD146分子 规格: 48T/96T
granulysin 人颗粒溶素 规格: 48T/96T
Gzms-B 人颗粒酶B 规格: 48T/96T
GV3101(pSoup-19) 感受态细胞 100ul*10 Gzms-A 人颗粒酶A 规格: 48T/96T
Cox V-IgM 人柯萨奇病毒IgM 规格: 48T/96T
Cox V-IgG 人柯萨奇病毒IgG 规格: 48T/96T
AHA 人抗组蛋白抗体 规格: 48T/96T
H2A-H2B 人抗组蛋白 规格: 48T/96T
EMAb 人抗子宫内膜抗体 规格: 4
shēng huà shì jì 二苯基联苯胺 容量: 2~8℃ 10毫升
shēng huà shì jì 二苯基甲烷 容量: 0.25毫升
shēng huà shì jì 二苯基甲醇 容量: 保存:-20℃ 50毫克
shēng huà shì jì 二苯胍 容量: 保存:-20℃ 100毫克
shēng huà shì jì 二苯砜 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 二苯胺磺酸钠 容量: 2~8℃ 100毫克
shēng huà shì jì 二苯胺磺酸钡 容量: 2~8℃ 10毫升
shēng huà shì jì 二苯胺 容量: 10毫升
shēng huà shì jì 二*甲烷 容量: 保存:-20℃ 50毫克
shēng huà shì jì 蒽酮 容量: 100毫克
shēng huà shì jì 蒽醌-2-磺酸钠 容量: RT 1毫克
shēng huà shì jì 蒽醌 容量: 5毫升
shēng huà shì jì 蒽聪 容量: 100克
shēng huà shì jì * 容量: RT 5克
shēng huà shì jì 苊醌 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 锇粉 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 多效唑 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 多项目尿液化学分析控制品 容量: 100张/盒
shēng huà shì jì 多聚左旋赖氨酸 容量: RT 10克
shēng huà shì jì 多聚右旋赖氨酸 容量: 25克
shēng huà shì jì 多聚磷酸钠 容量: 500毫克
shēng huà shì jì 多聚甲醛 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 多聚半乳糖醛酸钠 容量: 25克
shēng huà shì jì 多聚半乳糖醛酸 容量: 100克
shēng huà shì jì 多价蛋白胨-酵母膏培养基 容量: 100克
shēng huà shì jì 多价蛋白胨 容量: 100克
shēng huà shì jì 多酚氧化酶(菌菇) 容量: 2~8℃,避光 1克
8T/96T
注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤:
1.取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3.42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟
4.每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
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