GV3101（pJlC SA-rep）电击感受态细胞-生命科学仪器 返回列表页

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培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作方法：
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。

 AFA/snoRNP/U3RNP 人抗核仁纤维蛋白抗体 规格： 48T/96T

 ANA 人抗核仁抗体 规格： 48T/96T

 gp210 人抗核膜糖蛋白210抗体 规格： 48T/96T

 ANA 人抗核抗体 规格： 48T/96T

 ASA 人抗骨骼肌抗体 规格： 48T/96T

 anti-tox IgM 人抗弓形体IgM抗体 规格： 48T/96T

 anti-tox IgG 人抗弓形体IgG抗体 规格： 48T/96T

 AGAA 人抗高尔基体抗体 规格： 48T/96T

 LMA 人抗肝细胞膜抗体 规格： 48T/96T

GV3101（pJlC SA-rep）电击感受态细胞 50ul*50 LC1 人抗肝细胞胞质1型抗体 规格： 48T/96T

 LSP 人抗肝特异性脂蛋白抗体 规格： 48T/96T

 LSP 人抗肝特异性脂蛋白抗体 规格： 48T/96T

 LKM 人抗肝肾微粒体抗体 规格： 48T/96T

 CAM-ab 人抗钙调素特异抗体 规格： 48T/96T

 AT-DⅣ 人抗钙蛋白酶抑素抗体 规格： 48T/96T

 anti-PIV IgM 人抗副流感病毒IgM抗体 规格： 48T/96T

 anti-RV IgG 人抗风疹病毒IgG抗体 规格： 48T/96T

 ABM-Ab 人抗肺泡基底膜抗体 规格： 48T/96T

 MSA 人抗纺锤体抗体 规格： 48T/96T

 PM-Scl/PM-1 人抗多发性肌炎硬皮病抗体 规格： 48T/96T

 anti-HDV 人抗丁型肝炎病毒抗体 规格： 48T/96T

 PR3 Ab-IgG 人抗蛋白酶3抗体IgG 规格： 48T/96T

 ssDNA 人抗单链DNA抗体/变性DNA抗体 规格： 48T/96T

 AMA 人抗单核细胞抗体 规格： 48T/96T

 TRAb 人抗促甲状腺素受体抗体 规格：

shēng huà shì jì 次亚磷酸钙 容量： RT 100克

shēng huà shì jì 次* 容量： 10克

shēng huà shì jì 次氯酸钠 容量： 500克

shēng huà shì jì 次氯酸钙 容量： RT 5克

shēng huà shì jì 酸铵 容量： RT 500克

shēng huà shì jì 次甲基绿 容量： 100克

shēng huà shì jì 次铋 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 纯水 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 虫胶 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 赤藓糖醇 容量： 100克

shēng huà shì jì 赤霉素GA4+7 容量： RT 5克

shēng huà shì jì 赤霉素GA3 容量： 500克

shēng huà shì jì 橙黄IV 容量： 2～8°C 100克

shēng huà shì jì 橙黄G6 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 橙黄Ⅱ 容量： 2～8°C 250克

shēng huà shì jì 橙黄Ⅰ 容量： 2～8°C 250克

shēng huà shì jì 成套缓冲剂 容量： 保存：-20℃ 50次/300ul/支

shēng huà shì jì 称量纸 容量： 100毫克

shēng huà shì jì 潮霉素B 容量： RT 25克

48T/96T

注意事项:

1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤：
1．取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100        μl感受态细胞能够被1         ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3．42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟
4．每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
 5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。