ATCC细胞复苏的原则－快速融化

ATCC细胞必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。
具体操作
1.实验前准备
 （1）将水浴锅预热至37℃。（使用烧杯盛装37度水也可）
 （2）用75％酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面.
（3）在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。
 2.取出冻存管
 （1）根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。
 （2）从液氮罐中取出细胞盒，取出所需的细胞，同时核对管外的编号。
 3.迅速解冻
 （1）迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻，并要不断的摇动，使管中的液体迅速融化。
 （2）约1-2min后冻存管内液体*溶解，取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁，再拿入超净台内。
 4.平衡离心
（将冻存管中的液体倒入离心管中，加入4ml培养基，离心——除去DMSO）用托盘天平平衡后，放入离心机中3000r/min离心3min。
 5.制备细胞悬液
 （1）吸弃上清液。
 （2）向离心管内加入10ml培养液，吹打制成细胞悬液。
 6.ATCC细胞计数：细胞浓度以5×105/ml为宜。
Triamterene     200mg    三氨喋啶标准品    396-01-0 
Tributyl Citrate     500mg    柠檬酸三丁酯标准品    77-94-1 
Tributyl Phosphine Oxide    25mg    三正丁基氧化磷标准品    814-29-9 
Trichlormethiazide    200mg    三氯噻嗪标准品    133-67-5 
Triclosan     200mg    三氯生标准品    3380-34-5 
Tridihexethyl Chloride    200mg    曲地氯铵标准品    4310-35-4 
Trientine Hydrochloride    200mg    盐酸三乙烯四胺标准品    38260-01-4 
Triethyl Citrate     500mg    柠檬酸三乙酯标准品    77-93-0 
Trifluoperazine Hydrochloride     200mg    盐酸三氟拉嗪标准品    440-17-5 
Triflupromazine Hydrochloride    200mg    盐酸三氟丙嗪标准品    1098-60-8 
ATCC细胞