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对于细胞培养怎么换液?

时间:2017-8-16阅读:424
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细胞培养处于旺盛增殖期后,消耗了培养基中的营养,产生的细胞代谢产物对细胞继续增殖产生不利影响,因此需要及时更换培养基,这一过程称为换液。
 
环境准备:相对密封、防尘、防菌的无菌室
 
操作者准备:双手清洁呈可操作状态
 
物品准备:超净工作台、CO2培养箱、95%酒精灯、PBS、(较常用)、10?S(DMEM)(根据需要)、巴氏吸管、75%酒精棉球罐、废液缸。
 
(a)细胞换液步骤:
 
1. 打开层流,打开层流间和超净台的紫外线灯,废液缸和吸管同时照射;
 
2. 把水浴锅调整到37℃ 并使其稳定;
 
3. 将新鲜培养基放置到水浴锅中,注意防止水面高于瓶肩,100ml液体保持10分钟,(200ml液体保持15分钟,500ml液体保持20分钟),间或摇动;
 
4. 着无菌服装,帽子,口罩和手套
 
5. 用75%乙醇消毒培养基瓶外壁,放置到超净台上;
 
6. 将细胞培养瓶取出,用75%乙醇棉球消毒瓶底;
 
7. 用吸管吸弃旧培养基,更换吸管,于非细胞培养面加入新鲜培养基;
 
8. 记录实验过程和细胞培养瓶号。
 
(b)细胞培养注意事项:
 
1、全程无菌操作观念要强;
 
2、加培养液时,不可直接加到细胞贴壁的面上
 F-TESTO     大鼠游离睾酮     规格:    48T/96T
 f-βCG     大鼠游离β绒毛膜*     规格:    48T/96T
 Hp-IgG     大鼠幽门螺旋菌IgG     规格:    48T/96T
 INHBP     大鼠抑制素结合蛋白     规格:    48T/96T
 INH-B     大鼠抑制素B     规格:    48T/96T
 OSM     大鼠抑瘤素M     规格:    48T/96T
 AChE     大鼠乙酰*酯酶     规格:    48T/96T
 AChRab     大鼠乙酰*受体抗体     规格:    48T/96T
 Ach     大鼠乙酰*     规格:    48T/96T
 ALDH     大鼠乙醛脱氢酶     规格:    48T/96T
 ADH     大鼠乙醇脱氢酶     规格:    48T/96T
细胞培养

 

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