大鼠载脂蛋白B（APOB）ELISA试剂盒操作程序和洗板方法

大鼠载脂蛋白B(APOB)ELISA试剂盒操作程序：APOB试剂盒；大鼠载脂蛋白B(APOB)ELISA试剂盒使用前请先将试剂盒在室温下平衡半小时。
空白孔不加样，只加显色剂A，B和终止液用于调零。
标准品孔：每孔加入稀释好的标准品50μl，零孔加入标准品/样品稀释液50μl，然后加入*抗原工作液50μl(零孔必须要做，并将其作为标曲的后一个点)。
样品孔：加入样品50μl（*直接加样，浓度高可以用样品稀释液稀释2-5倍），然后加入*抗原工作液50μl。
轻轻摇晃，盖上封板膜，37℃培养箱中孵育30min。
将25倍浓缩洗涤液用蒸馏水25倍稀释后备用。

g.       次洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

加入50μl亲和素-HRP到标准品孔和样品孔中，轻轻摇晃，盖上封板膜，37℃培养箱中孵育30min。

i.        第二次洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

j.        显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟。

k.       终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色).

l.        测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后10分钟以内进行。

m.     计算：APOB试剂盒；大鼠载脂蛋白B(APOB)ELISA试剂盒根据浓度和OD值算出标准曲线的回归方程，建议用计算软件进行计算，*使用ELISAcalc进行计算，拟合模型选用logistic曲线（四参数）。

大鼠载脂蛋白B(APOB)ELISA试剂盒洗板方法

a.手工洗板：先洗去酶标孔中的的液体，在吸水纸上拍干，然后每孔加入300μl稀释好的洗涤液，轻轻摇晃30秒，然后甩掉，在吸水纸上拍干，重复4-5次。

b.洗板机洗板：洗板机洗板比较便捷，但应操作熟练后使用。