小鼠颗粒体蛋白（GRN）elisa定量检测试剂盒检测原理和样本采集

小鼠颗粒体蛋白（GRN）elisa定量检测试剂盒

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗颗粒体蛋白(GRN)抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的颗粒体蛋白(GRN)会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入*化的抗颗粒体蛋白(GRN)抗体和 辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗颗粒体蛋白(GRN)抗体与结合在包被抗体上的颗粒体蛋白(GRN)结合、*与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根 过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，颗粒体蛋白(GRN)浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中颗粒体蛋白(GRN)的浓度。

小鼠颗粒体蛋白（GRN）elisa定量检测试剂盒

样品收集:

1.血清：全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集 血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。

2.血浆：抗凝剂*使用EDTA-Na2，样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可 检测。避免使用溶血，高血脂样品。

3.组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会 影响测量结果），称重后将*碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体 积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。 *在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组 织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟， 取上清检测。

4.细胞培养上清：取细胞培养上清于1000×g离心20分钟，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。

5.其它生物样品：1000×g离心20分钟，取上清即可检测 具体处理方法可参考：

6.样品应清澈透明，悬浮物应离心去除。

7.样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻 存于-20℃(1个月内检测)，或-80℃（6个月内检测），避免反复冻融。

8.如果您的样品中检测物浓度高于标准品zui高值，请根据实际情况，做适当倍数稀释（建议先 做预实验，以确定稀释倍数）。