人细胞周期素A1elisa定量检测试剂盒的检测原理和检测前准备工作

人细胞周期素A1（CCNA1）elisa定量检测试剂盒   检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心法：抗人细胞周期素A1(CCNA1)单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的细胞周期素A1(CCNA1)会与单抗结合，游离的成份被洗去。加入酶标抗体，抗人细胞周期素A1(CCNA1)抗体与结合在单抗上的人细胞周期素A1(CCNA1)结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有细胞周期素A1(CCNA1)，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450nm处测OD值，细胞周期素A1(CCNA1)浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中的细胞周期素A1(CCNA1)浓度。

人细胞周期素A1（CCNA1）elisa定量检测试剂盒    检测前准备工作:

1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。

2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象，可用40℃水浴微加热使结晶*溶解后再配制洗涤液（加热温度不要超过50℃，使用时洗涤液应为室温）。当日使用。

3. 标准品: 于10000×g离心1分钟，加入标准品&样品稀释液1.0mL至冻干标准品中，旋紧管盖，静置10分钟，上下颠倒数次，待其充分溶解后，用移液器将其轻轻混匀（浓度为10ng/mL。）。然后根据需要进行倍比稀释（注：不要直接在反应孔中进行倍比稀释）。建议配制成以下浓度：按照稀释方法图例 标准品&样品稀释液直接作为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准品：取0.5mL10ng/mL的上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释液的EP管中，混匀即可，其余浓度依此类推。  

4. *化抗体工作液：实验前计算当次实验所需用量（以100μL/孔计），实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟，以*化抗体稀释液稀释浓缩*化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。

5. 酶结合物工作液：实验前计算当次实验所需用量（以100μL/孔计），实际配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟，以酶结合物稀释液稀释浓缩HRP酶结合物(1:100)成工作浓度。