小鼠 ELISA 检测试剂盒操作及方案

                      小鼠 ELISA 检测试剂盒操作及方案

  小鼠 ELISA试剂盒是夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）​公司的理念是：以诚信为本，努力打造品牌，为您提供的售中、售后服务。.已知小鼠 ELISA死因子浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。本公司的产品良好及服务。先将小鼠 ELISA和*标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中小鼠 ELISA子的浓度呈比例关系。

操作步骤

1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。

3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5． 每孔加入50ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。

建议使用的实验方案

  标准品浓度（pg/ml）  

A 360 360 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品

B 180 180 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品

C 90 90 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品

D 45 45 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品

E 22.5 22.5 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品

F 0 0 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品

G 样本 样本 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品

H 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品