人脐静脉平滑肌细胞操作方法 返回列表页

产品名称：人脐静脉平滑肌细胞操作方法
英文名称：Human umbilical vein smooth muscle cells
规格：5×105cells/瓶
产品货号：FS-X0004
人脐静脉平滑肌细胞操作方法的运输和保存
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
收到后的处理：
1）收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2）请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3）弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4）如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的*培养基。
5）接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得。
人脐静脉平滑肌细胞操作方法培养操作流程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备F-12K培养基（F-12K，GIBCO,货号21127-022），90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混 合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换 液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
3.轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养液后吹匀。
4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
      1，细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，细胞变圆脱落后，加入1ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
      2，4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度不低于1x10E6/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。
      3，将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

人胶原凝集素(Collectin)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Collectin ELISA Kit 
人伴侣蛋白10(CPN10)ELISA试剂盒    进口/分装    Human chaperonin 10,CPN10 ELISA Kit 
人纤调蛋白(FMOD)ELISA试剂盒    进口/分装    Human fibromodulin,FMOD ELISA Kit
人钙网蛋白(CRT)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Calreticulin,CRT ELISA Kit 
人网膜素(omentin)ELISA试剂盒    进口/分装    Human omentin ELISA Kit
人基质γ羧基*蛋白(MGP)ELISA试剂盒     进口/分装    Human Matrix Gla Protein,MGP ELISA Kit
人基质裂解蛋白/基质溶素(MAT)ELISA试剂盒     进口/分装    Human matrilysin,MAT ELISA Kit
人溶酶体相关膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA试剂盒     进口/分装    Human human lysosomal-associated membrane protein 2,HLAMP-2 ELISA Kit
人软骨糖蛋白39(HC gp-39)ELISA试剂盒     进口/分装    Human Cartilage glycoprotein 39,HC gp-39 ELISA Kit
人不透光相关蛋白(OPAs)ELISA试剂盒     进口/分装    Human Opacity-associated proteins,OPAs ELISA Kit
人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA试剂盒    进口/分装    Human flagellin ELISA Kit
人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA试剂盒     进口/分装    Human Poly Serium Antigen,PHSA ELISA Kit
人胞浆免疫球蛋白(CIg)ELISA试剂盒     进口/分装    Human cytoplasmic immunoglobulin,CIg ELISA Kit
人纤维介素蛋白(fgl2)ELISA试剂盒     进口/分装    Human Fibrinogen like peptide 2,fgl2 ELISA Kit
人泛素蛋白(Ub)ELISA试剂盒     进口/分装    Human Ubiquitin,Ub ELISA Kit
人类粘蛋白(ORM)ELISA试剂盒    进口/分装    Human orosomucoid,ORM ELISA Kit
人弹性蛋白(ELN)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Elastin,ELN ELISA Kit
人套膜蛋白(iNV)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Involucrin,iNV ELISA Kit
人肌腱蛋白R(TN-R)ELISA试剂盒    进口/分装    Human tenascin-R,TN-R ELISA Kit
人生长相关蛋白43(GAP-43)ELISA试剂盒    进口/分装    Human growth-associated protein 43,GAP-43 ELISA Kit
人cAMP反应元件结合蛋白(CREB)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Cyclic AMP response element binding protein,CREB ELISA Kit
人聚集蛋白(Agrin)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Agrin ELISA Kit 
人Agouti相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Agouti Related Protein,AGRP ELISA Kit 
人膜辅蛋白(MCP/CD46)ELISA试剂盒     进口/分装    Human membrane cofactor protein,MCP ELISA Kit
人延伸蛋白A(EloA)ELISA试剂盒    进口/分装    Human elongin A,EloA ELISA Kit
人酰化刺激蛋白(ASP)ELISA试剂盒     进口/分装    Human Acylation Stimulating Protein,ASP ELISA Kit
人杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA试剂盒     进口/分装    Human bactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPI ELISA Kit
人细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA试剂盒     进口/分装    Human matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE ELISA Kit
人复制蛋白A(RPA-70)ELISA试剂盒     进口/分装    Human replication protein A,RPA-70 ELISA Kit
人软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒     进口/分装    Human cartilage oligomeric matrix protein,COMP ELISA Kit
人抗原提呈相关转运蛋白/T细胞活化蛋白(TAP)ELISA试剂盒    进口/分装    Human transporter associated with antigen processing,TAP ELISA Kit
人免疫抑制酸性蛋白(IAP)ELISA试剂盒    进口/分装    Human immunosuppressive acidic protein,IAP ELISA Kit
人麦角蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Gliadin IgA ELISA Kit
人发动蛋白2(DNM2)ELISA试剂盒    进口/分装    Human dynamin 2,DNM2 ELISA Kit
人着丝粒蛋白B(CENP-B)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Centromere Protein,CENP-B ELISA Kit
人巨噬细胞刺激蛋白(MSP)ELISA试剂盒    进口/分装    Human macrophage stimulating protein,MSP ELISA Kit
人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA试剂盒     进口/分装    Human mammalian target of rapamyein,mTOR ELISA Kit
人核基质蛋白22(NMP-22)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Nuclear matrix protein 22,NMP-22 ELISA Kit
人软骨寡聚蛋白(COMP)ELISA试剂盒    进口/分装    Human cartilage oligomeric protein,COMP ELISA Kit
人多药耐药相关蛋白(MRP)ELISA试剂盒    进口/分装    Human multidrug resistance-associated protein,MRP ELISA Kit 
人高速泳动蛋白17(HMG-17)ELISA试剂盒     进口/分装    Human high mobility group protein 17,HMG-17 ELISA Kit
人空泡毒素相关蛋白A(VacA)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Vacuolating cytotoxin A,VacA ELISA Kit
人玻连蛋白/体外粘连蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA试剂盒    进口/分装    Human vitronectin,VNR ELISA Kit
人波形蛋白(VIM)ELISA试剂盒    进口/分装    Human vimentin,VIM ELISA Kit
人表面活性蛋白D(SP-D)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Surfactant Protein D,SP-D ELISA Kit
人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA试剂盒    进口/分装    Human arabinogalactan proteins,AGPs ELISA Kit
人N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-*(AcSDKP)ELISA试剂盒    进口/分装    Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit 
人脑红蛋白(NGB)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Neuroglobin,NGB ELISA Kit 
人的牛血清白蛋白残留检测ELISA试剂盒    进口/分装    Human rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit
人β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒    进口/分装    Human amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit
人巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒    进口/分装    Human macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA Kit 
人凝胶原蛋白(gelson)ELISA试剂盒    进口/分装    Human gelson ELISA Kit
人踝蛋白(talin)ELISA试剂盒    进口/分装    Human talin ELISA Kit
人脐静脉平滑肌细胞操作方法人角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒    进口/分装    Human keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit
小鼠FMS样*激酶3配体(Flt3L)ELISA试剂盒    进口/分装    Mouse FMS-like tyrosine kinase 3 ligand,Flt-3L ELISA Kit 
小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒    进口/分装    Mouse