rEPC大鼠内皮祖细胞-骨髓操作方法 返回列表页

产品名称：rEPC大鼠内皮祖细胞-骨髓操作方法
英文名称：REPCrat endothelial progenitor cellsof bone marrow
规格：5×105cells/瓶
产品货号：FS-X0034
rEPC大鼠内皮祖细胞-骨髓操作方法的运输和保存
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
收到后的处理：
1）收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2）请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3）弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4）如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的*培养基。
5）接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得。
rEPC大鼠内皮祖细胞-骨髓操作方法培养操作流程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备F-12K培养基（F-12K，GIBCO,货号21127-022），90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混 合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换 液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
3.轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养液后吹匀。
4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
      1，细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，细胞变圆脱落后，加入1ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
      2，4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度不低于1x10E6/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。
      3，将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

人抗BB抗体(BB-Ab)ELISA试剂盒     进口/分装    Human anti-B burgdorleri antibody,BB-Ab ELISA Kit
人抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Anti-smooth muscle antibody,ASMA ELISA Kit
人抗肝细胞膜抗体(LMA)ELISA试剂盒    进口/分装    Human anti-liver cell membrane antibody,LMA ELISA Kit
人抗肝特异性脂蛋白抗体(LSP)ELISA试剂盒    进口/分装    Human liver specific lipoprotein,LSP ELISA Kit
人抗眼肌抗体(EMAb)ELISA试剂盒    进口/分装    Human eye muscle antibody,EMAb ELISA Kit
人抗补体1q抗体(C1q)ELISA试剂盒     进口/分装    Human Anti-Complement 1q antibody,C1q ELISA Kit
人抗内因子抗体(IFA)ELISA试剂盒    进口/分装    Human intrinsic factor antibody,IFA ELISA Kit
人抗磷脂抗体(Apl/APA)ELISA试剂盒    进口/分装    Human anti-phospholipid antibody,Apl/APA ELISA Kit
人抗组蛋白抗体(AHA)ELISA试剂盒    进口/分装    Human anti-Histone antibody,AHA ELISA Kit
人晶体蛋白α(Cryα)ELISA试剂盒    进口/分装    Human crystal proteins α,Cryα ELISA Kit
人晶体蛋白β(Cryβ)ELISA试剂盒     进口/分装    Human crystal proteins β,Cryβ ELISA Kit 
人抗胶原蛋白抗体(CLA)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Collagen autoantibody,CLA ELISA Kit
人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)ELISA试剂盒    进口/分装    Human anti-filaggrin antibody,AFA ELISA Kit
人抗核抗体(ANA)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Anti-nuclear Antibody,ANA ELISA Kit
人抗肝肾微粒体抗体(LKM)ELISA试剂盒    进口/分装    Human liver kidney microsome autoantibody,LKM ELISA Kit
人抗α干扰素抗体(IFNα-Ab)ELISA试剂盒    进口/分装    Human InterferonαAntibody,IFNα-Ab ELISA Kit
人抗Sc1-70抗体(Sc1-70-Ab)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Sc1-70 Antibody,Sc1-70-Ab ELISA Kit
人Jo1抗体/抗组氨酰tRNA合成酶抗体(Jo1/HRS)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Jo-1 Antibody,Jo1/HRS ELISA Kit
人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)ELISA试剂盒    进口/分装    Human anti-ribonucleo protein Antibody,RNP-Ab ELISA Kit
人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)ELISA试剂盒    进口/分装    Human natural deoxyribonucleic acid antibody,n-DNA-Ab ELISA Kit
人抗可提取核抗原抗体(ENA-Ab)ELISA试剂盒    进口/分装    Human anti-extractable nuclear antigen antibody,ENA-Ab ELISA Kit
人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)ELISA试剂盒    进口/分装    Human deoxyribonucleic protein antibody,DNP-Ab ELISA Kit
rEPC大鼠内皮祖细胞-骨髓操作方法人蛋白酶3抗体(PR3Ab)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Proteinase 3 Antibody,PR3Ab ELISA Kit
人抗肝可溶性抗原抗体(SLA)ELISA试剂盒    进口/分装    Human Proteinase 3 Antibody,PR3Ab ELISA Kit
人β乳糖蛋白抗体IgG ELISA试剂盒    进口/分装    Human β anti-galactan proteins IgG ELISA Kit
人抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)ELISA试剂盒    进口/分装    Human anti-Endomysial Antibody IgA,EMA IgA ELISA Kit
人EJ抗体/抗甘氨酰tRNA合成酶抗体(EJ/GlyRS)ELISA试剂盒     进口/分装    Human anti-EJ-antibody，EJ/GlyRS ELISA Kit
人低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)ELISA试剂盒    进口/分装    Human LDL-IC ELISA Kit