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产品名称:H-97(人高转移肝癌细胞)*
英文名称:H-97(highly metastatic human hepatocellular carcinoma cell)
规格:5×105cells/瓶
产品货号:FS-X0832
H-97(人高转移肝癌细胞)*的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
收到后的处理:
1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的*培养基。
4)如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的*培养基。
5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得。
H-97(人高转移肝癌细胞)*培养操作流程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备F-12K培养基(F-12K,GIBCO,货号21127-022),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混 合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换 液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
3.轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养液后吹匀。
4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;
1,细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2,4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x10E6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。
3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
MCP-4/CCL13 ELISA Kit 大鼠单核细胞趋化蛋白4 96T
PPAR- Alpha ELISA Kit 大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α 96T
M-CSF(Human Macrophage Colony-Stimulating Factor) ELISA kit 人巨噬细胞集落刺激因子 96T
P-PKC(Mouse phospho Protein Kinase C) ELISA Kit 小鼠磷酸化蛋白激酶C 96T
MIC-1 human ELISA kit 人巨噬细胞抑制因子-1 ELISA 试剂盒 96T
MCP-3/CCL7(Human monocyte chemotactic protein 3) ELISA kit 人单核细胞趋化蛋白3 96T
pERK(Mouse phospho-extracellular signal-regulated kinase) ELISA Kit 小鼠磷酸化细胞外信号调节激酶 96T
CAM ELISA Kit 大鼠钙调素 96T
CCB(Mouse calcium channel blockers) ELISA Kit 小鼠钙通道阻滞剂 96T
Apo-E ELISA Kit 大鼠载脂蛋白E 96T
MCP-2/CCL8(Human monocyte chemotactic protein 2) ELISA kit 人单核细胞趋化蛋白2 96T
MCP-1/CCL2/MCAF(Human monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor) ELISA kit 人单核细胞趋化蛋白1 96T
ALT/GPT(Mouse Alanine Aminotransferase) ELISA Kit 小鼠*转氨酶/谷丙转氨酶 96T
omentin ELISA Kit 大鼠网膜素 96T
BMPs(Mouse bone morphogenetic proteins) ELISA Kit 小鼠骨形成蛋白 96T
Human L-Selectin ELISA kit 人L选择素 96T
OFQ/N ELISA Kit 大鼠孤腓肽 96T
PP ELISA Kit 大鼠蛋白磷酸酶 96T
RBP-4(Mouse Retinol-binding protein 4) ELISA Kit 小鼠*结合蛋白4 96T
IL-9(Human Interleukin 9) ELISA KIT 人白介素9 96T
IL-8/CXCL8(Human Interleukin 8) ELISA KIT 人白介素8 96T
6-keto-PGF1a(Mouse 6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺素F1a 96T
TrxR ELISA Kit 大鼠硫氧还蛋白还原酶 96T
TH-97(人高转移肝癌细胞)*rx ELISA Kit 大鼠硫氧化还原蛋白 96T
Pentosidine(Mouse Pentosidine) ELISA Kit 小鼠戊糖素 96T
IL-6(Human Interleukin 6) ELISA KIT 人白介素6 96T
Collagenase II ELISA Kit 大鼠胶原酶II 96T
AGEs(Mouse advanced glycation end products) ELISA Kit 小鼠晚期糖
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