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血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因zi后,分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。血清的主要作用是提供基本营养物质,包括激素、维生素、转运蛋白、微量元素、扩散因子和生长因子等细胞增殖和维持的必需成分,促进细胞生长。那么怎么判断血清的优劣呢?
外观
颜色:根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,实际上,血红蛋白含量的高低对血清质量并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度。胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。
澄清度:高质量的胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡,而新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深。
血清沉淀:血清有沉淀,是质量问题?血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,跟加工生产方式、是否反复冻融密切相关。虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。
理化检测
总蛋白:中国药典规定血清中总蛋白含量应为35-50g/L。一般胎牛血清的总蛋白含量相对比较低,随着牛龄增加,血清中蛋白含量也会增加。
血红蛋白:血红蛋白的含量经常直观体现在牛血清产品的外观颜色,血清一般是淡黄色,有时也会偏红,这是正常现象,牛血清中的红色来自于血红蛋白中结合的血红素。中国药典规定血清中血红蛋白应不超过200 mg/L。实际上,血红蛋白含量的高低对血清的细胞培养效果并无直接影响,但良好的生产工艺能降低红细胞的溶血。
内毒素:内毒素是革兰氏阴性菌破裂后的细胞壁的成分,不同细胞在对内毒素的耐受性上表现出极大的差异,中国药典规定血清内毒素含量≤10EU/ml。内毒素含量越低,表明血清处理环境越干净。
微生物检测
1、 细菌、真菌等生物在生产过程中几乎都能100%控制。
2、 支原体可以通过3次0.1μm无菌过滤去除。
3、 噬菌体主要来源于采血、生产环境,是否出现噬菌体污染是检测牛血清加工过程中是否受到外源性污染的一个重要指标。
病毒检测
牛血清富含各种营养,如果怀孕母牛本身携带有\病毒,血清就会受到污染。因此,从源头上保证母牛健康、没有各种传染病,建立血清溯源机制,选择经检疫的正规渠道的血清,才有质量保障。
细胞增殖测试
血清的成分含量复杂,不同批次之间也存在差异,为了检测不同批次血清对特定体外细胞株生长的效力,需要对每一批次的血清进行细胞培养测试。按照中国药典要求选取Sp2/0-Ag14进行细胞增殖实验,测定细胞生长曲线、倍增时间、克隆率及单细胞增殖率,同时测试多种常见细胞系如MRC-5、ST、293T、CHO、VERO等细胞的生长率,为血清品质评估提供多角度参考。
以上就是有关于怎么判断血清的优劣的方法,如果你想了解更多请给百奥创新留言哦~
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