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特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
产品名称 | 分类 | 货号 |
枯草芽孢杆菌核酸检测试剂盒 | 恒温荧光法 | FS-P10776 |
PCR技术的定量原理:
扩增曲线
在Real-time qPCR中,对整个PCR反应扩增过程进行了实时的检测并记录其荧光信号,随着反应的进行,监测到的荧光信号可以绘制成一条曲线,即为扩增曲线。荧光扩增曲线一般分为基线期、指数增长期和平台期。
在Real-time qPCR扩增早期,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化,此时即为基线期。
PCR反应过程中产生的DNA拷贝数是呈指数形式增加的,随着反应循环数的增加,最终PCR反应不再以指数形式生成模板,从而进入“平台期”。在该时期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR的终产物量与起始模板量之间无线性关系,所以根据最终的PCR产物量不能计算出初始模板量。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
PCR检测试剂盒:
(一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中,按100g:3ml的比例加入Trizol试剂,严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg组织,宁多勿少)置于玻璃匀浆器中匀浆后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振荡15s,室温置5min。
(5)4ºC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol,振摇,置室温10min。
(8)4ºC 12000g离心10min,EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清,纸巾吸干,加入75%乙醇1ml,振摇,充分洗涤沉淀。
(10)4ºC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇,空气干燥10min(可离心加快干燥,尽量吸尽离心液体)。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混匀),-20ºC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度,所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳,显示出清晰的28s和18s两条rRNA。
-1613℃冰箱冻结;真空冷冻干燥
青霉培养基: 0015产生果胶酶提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no生长条件: 25-28℃ 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
ivcas7.00840培养基: 0002模式菌株: no种属: Paenibacillus│polymyxa提供形式: 冻干物安全等级: 1生长条件: 28-32℃ 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
麦根腐平脐蠕孢生长条件: 18-22℃培养基: 0014提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no
枯草芽孢杆菌培养基: CM0050α-淀粉酶。提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no生长条件: 30℃ 真空冷冻干燥法
食油假单胞菌培养基: 820模式菌株: no沙土提供形式: 冻干物安全等级: 1生长条件: 29℃ 真空冷冻干燥法
玫瑰变色菌培养基: 471潜在的有机污染物降解菌/分离自多环芳烃(PAHs)富集菌群水样/深海底层水样提供形式: 冻干物模式菌株: no生长条件: 25℃ 液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法
-1614℃冰箱冻结;真空冷冻干燥
AS3.4302培养基: Czapek's 琼脂:蔗糖 30.0 g,NaNO3 3.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,KCl 0.5 g,FeSO4·4H2O 0.01 g,K2HPO4 1.0 g,琼脂 15.0 g,蒸馏水 1.0 L,pH 6.0-6.5,121℃,15min。121℃,15min。耐21%CuSO4种属: Penicillium ochrochloron安全等级: 1模式菌株: no生长条件: 25-26℃,好氧
ivcas7.00114模式菌株: no安全等级: 1种属: Lysinibacillus│sphaericus土壤提供形式: 冻干物杀虫范围: 库蚊培养基: 0002
多杀性巴氏杆菌研究模式菌株: no不清楚提供形式: 冻干物安全等级: 2培养基: 56生长条件: 37
艾比嗜盐碱红菌基础理论及应用研究模式菌株: no卤水及底泥提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: 0926生长条件: 37℃
ivcas7.00721模式菌株: no安全等级: 1种属: Bacillus│thuringiensis土壤提供形式: 冻干物培养基: 0002生长条件: 30℃
黑木耳生长条件: 25℃培养基: 0014提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no 真空冷冻干燥法;矿物油法;定期移植法
-1615℃冰箱冻结;真空冷冻干燥
多主葡萄壳菌培养基: 14模式菌株: no苹果果实提供形式: 斜面培养物安全等级: 1生长条件: 25 定期移植法
盐多奈哌齐III型(标准品)SHP2 peptide 蛋白酪氨磷酶2抗原TBL1Y 转导β样蛋白1抗体
达马莫德SIP1 peptide 运动神经元存活蛋白结合蛋白1抗原TBL1X 转导素β1X连锁蛋白抗体
盐多佐胺;盐杜塞酰胺SIRT1(sirtuin 1) 沉默调节蛋白1抗原TBCD4/TBC1D4 TBC结构域TBCD4蛋白抗体
盐多佐胺;盐杜塞酰胺(标准品)Skp2 peptide S相激酶相关蛋白抗原TBCD/Beta tubulin cofactor D 微管蛋白β辅助因子D抗体
甲磺多沙唑SLC4A4(solute carrier family 4:sodium bicarbonate cotransporter NBC1) 碳氢钠协同转运蛋白4-A4Tau protein 微管相关蛋白抗体
甲磺多沙唑(标准品)Slc4a7/Nbcn1(solute carrier family 4, sodium bicarbonate cotransporter, member 7) 碳氢钠协同转运蛋白4-A7抗原Tau protein 微管相关蛋白抗体
盐多柔比星/盐阿霉素Smac/DIABLO(the second mitochondrial activator of caspase) 线粒体促凋亡蛋白抗原Tat 酪氨转氨酶抗体
盐多柔比星/盐阿霉素(标准品)SLC33A1(Acetyl-coenzyme A transportor 1) 乙酰辅酶A转运蛋白1抗原TASK 3/KCNK9 敏感性离子通道蛋白抗体
盐强力霉素/盐多西环素SLC34A2/NaPi-2b(Solute carrier family 34 member 2) 磷钠协同转运蛋白抗原TAS2R7/T2R6 味觉感受器蛋白T2R6抗体
盐强力霉素/盐多西环素(标准品)SMN1(survival of motor neuron 1) 运动神经元生存蛋白1抗原TAPA1/CD81 CD81抗体
枯草芽孢杆菌核酸检测试剂盒Diosmetin 香叶木素(标准品) 质量规格:>98%,BR
Cytisine 金雀花,野靛 质量规格:>98%,BR
Cytisine 金雀花,野靛(标准品) 质量规格:>98%,BR
Irbesartan 厄贝沙坦 质量规格:>98%,BR
5'-O-(4,4'-Dimethoxytrityl)-thymidine-3'-O-succinicacid 5'-O-(4,4'-二甲氧基三基甲基)-胸苷-3'-O-丁二 质量规格:>98%,BR
D-(−)-Salicin 水杨苷 质量规格:>98%,BR
D-(−)-Salicin 水杨苷(标准品) 质量规格:>98%,BR
Magnolol 厚朴酚 质量规格:>98%,BR
Magnolol 厚朴酚(标准品) 质量规格:>98%,BR
Esomeprazolemagnesiumtrihydrate 埃索美拉唑镁(三水) 质量规格:>98%,BR
Rutin 芦丁/芸香叶苷 质量规格:>98%,BR
Rutin 芦丁/芸香叶苷(标准品) 质量规格:>98%,BR
Neosperidindihydrochalcone 新橙皮苷二氢查尔 质量规格:>98%,BR
Neosperidindihydrochalcone 新橙皮苷二氢查尔(标准品) 质量规格:>98%,BR
Oxymatrine 氧化苦参 质量规格:>98%,BR
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