用免疫亲和反应选择gⅥ—cDKA噬菌体文库

[方法]
1.用10m1含1%（w/v）BSA的PBST稀释2．5ul抗血清，并倒入15ml聚丙烯管中，再加入1011～1012TU的gⅥ—cDNA噬菌体文库。
2．室温下缓慢旋转孵育该混合物1小时。
3．往混合物中加500ul 1/1（体积比）蛋白A—琼脂糖凝胶珠浆[在PBST用5%（w/v）BSA预处理]，在室温下再孵育l小时。
4．离心（500g 5分钟）收集蛋白A—琼脂糖凝胶珠并且用10ml PBST冲洗蛋白A—琼脂糖凝胶珠10次。
5．在1ml PBST溶液中打散蛋白A—琼脂糖凝胶珠，将混合物转移到微离心管中并旋转（10000g 10秒），除去上清液。
6．0．5m1 0．1mol/L盐酸*，pH 2．2，并加入0．1%（w/v）BSA溶液中打散蛋白A—琼脂糖凝胶珠。
7．室温下孵育样品10分钟。
8．快速离心样品（10000g 10秒）并将上清液转移到一新的微离心管中。
9．加30ul 2mol/LTrls中和该溶液，在冰浴中保存溶液。
10．噬菌体扩增，将抽提出来的一半噬菌体（256ul）加到平板Topl0F’细胞中。37℃温育30分钟。