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PAGE连续凝胶电泳缓冲液(2×,PH8.9)500ml免费代测使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿*、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不*用于检测组织样本。
PAGE连续凝胶电泳缓冲液(2×,PH8.9)500ml免费代测操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
PAGE连续凝胶电泳缓冲液(2×,PH8.9)500ml免费代测实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时,注意必须*清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
CXCL1 Protein Human 重组人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & SUMO 标签)
人膀胱上皮细胞*培养基 100mL
IL1RN Others Rat 大鼠 IL-1RA / IL1RN 人细胞裂解液 (阳性对照)
H22细胞,小鼠肝癌细胞 Neuro-2A(脑神经瘤细胞) EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0909
人胚肾细胞;2V6.11
SK-BR-3(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 狗 CD2 人细胞裂解液 (阳性对照)
CM-M044小鼠结肠平滑肌细胞*培养基100mL
DSC2 Others Rat 大鼠 DSC2 / Desmocollin-2 人细胞裂解液 (阳性对照)
角质细胞培养基KM-acf
HCE1细胞,细胞 小鼠红白血病细胞,MEL细胞 人脑血管外膜成纤维细胞HBVSMC
Hela S3(人细胞) 5×106cells/瓶×2
hMNC-PB single donor Pellet 人类外周血单核细胞团块单一捐献者,超纯 > 1 mio.cells 人羊膜上皮细胞总RNAHAmEpiC tRNA
ADK Others Human 人 ADK 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人肾系膜细胞RNAHRMC miRNA5 μg
水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7)
SHG-44细胞,胶质瘤细胞 NCTC克隆929细胞,L129细胞 人T淋巴瘤细胞Jurkat亚系;Jurkat77
C57小鼠黑色素瘤瘤株;ME (Me)
EFNB1 Others Human 人 EphrinB1 / EFNB1 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠*Ⅻ(FⅫ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人*蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G(Serpina3g)免疫试剂盒 human serine/cysteine peptidase inhibitor clade A member 3G,Serpina3g ELISA Kit
辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒 可见分光光度法 50管/24样
RatVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISA试剂盒大鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanluteotropichormone,LHELISA试剂盒*(LH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanpapillomavirusIgM,HPV-IgMELISAKit人状瘤病毒抗体IgM(HPV-IgM)ELISA试剂盒规格:96T/48T
山羊雌三醇(E3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human pancreatic cancer marker CA242ELISA Kit 人胰腺癌标志物CA242ELISA试剂盒
Humanα-glutathioneS-transferases,α-GSISAKit 人α*S转移酶(α-GST)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor,GDIELISA试剂盒人鸟苷酸解离抑制因子(GDI)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织*(proline)含量比色法定量检测试剂盒20次
humanMAXdimerizationprotein1,mxd1ELISAKit人MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
PAGE连续凝胶电泳缓冲液(2×,PH8.9)500ml免费代测大鼠乙型肝炎核心抗体(HBcAb)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠乙酰*转移酶(CHAT)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠乙酰*酯酶(AChE)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠乙酰*受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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