总蛋白提取试剂盒（无去垢剂）100T实验方法 返回列表页

总蛋白提取试剂盒（无去垢剂）100T实验方法使用注意事项
1．微量试剂取用前请离心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿*、戴手套等。
4．本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不*用于检测组织样本。
总蛋白提取试剂盒（无去垢剂）100T实验方法操作方法
1．悬浮细胞离心（2000rpm离心5min）收集；贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次（2000rpm离心5min）收集1~5×105细胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混匀；室温、避光、反应5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞；
4．请在1 hour内，进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A．荧光显微镜观察
1．滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞；
2．对于贴壁细胞来说，也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡；
（1）将细胞于盖玻片上生长，用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，并设立阴性对照组；
（2）用PBS洗涤细胞两次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混匀；
（4）将上述溶液滴加于盖玻片表面，使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖；
（5）避光、室温反应5 min。
3．将盖玻片倒置于载玻片上，于荧光显微镜下观察激发波长546nm，发射波长647 nm，7-AAD荧光信号呈红色。
B．流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测，激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
总蛋白提取试剂盒（无去垢剂）100T实验方法实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2％的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时，注意必须*清除EDTA：在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤，清除EDTA，以免残余的EDTA与Ca2＋螯合，影响Annexin V的结合。
（1）用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer；
（2）细胞收集。悬浮细胞收集：离心5分钟；贴壁细胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化时间不宜过长，否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合），于室温2000rpm离心5～10分钟，收集细胞；
（3）细胞洗涤：用预冷1×PBS（4℃）重悬细胞一次，2000rpm离心5～10分钟，洗涤细胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞；
（5）Annexin V-FITC标记：加入5μL的Annexin V-FITC混匀后，避光，室温孵育15分钟；
（6）PI标记：上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
（7）上机前，补加200μL的1×Binding Buffer。
胰岛素样生长因子

大鼠子宫平滑肌细胞*培养基 100mL

IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人细胞裂解液 (阳性对照)

CHO-K1仓鼠卵巢细胞亚株 CHO-K1 Chinese hamster ovary cell subline F-12K+10%FBS

原代内皮细胞培养特制添加剂Many types of cells包装：5/2.5/1ml

E.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 人卵巢成纤维细胞HOF
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM9402

CNTN4 Others Human 人 Contactin 4 / CNTN4 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

CM-H054人子宫成纤维细胞*培养基100mL

MDA-MB-231, 人癌细胞 骨髓瘤,P3-X63-Ag8细胞 SW 1271 [SW-1271; SW1271](人肺腺癌细胞)

小鼠正常肝细胞;NCTC 1469 [NCTC1469]

HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠小脑星形胶质细胞(MA-c)(5×105)

人真皮成纤维细胞-总RNAHDF-a tRNA

中国仓鼠肺细胞;CHL

小鼠肺腺癌低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);LA1-VAP33-GFP 小鼠虹膜色素上皮细胞*培养基 100mL

293T, SV40转化的人胚肾上皮细胞系 Human

DDR2 Others Mouse 小鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

人神经母细胞瘤抗体(NB-Ab)免疫试剂盒 Human anti-neuroblastoma-antibody,NB-Ab ELISA Kit

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BCL2蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次

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Humanplaetactivatingfactor，PAFELISAKit人血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人游离睾酮(F-TESTO)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

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