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核蛋白提取试剂盒(无去垢剂)100T使用说明书

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更新时间:2017-07-10 12:30:13浏览次数:318次

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核蛋白提取试剂盒(无去垢剂)100T使用说明书实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
    把试剂盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
1)取 1060 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 孵育20 分钟。
3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液()加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(),并放置于冰浴。
437孵育结束后,600g 4 离心3 4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
5)用JC-1 染色缓冲液()洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液()重悬细胞,600g 4 离心34 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液()重悬细胞,600g 4 离心 34 分钟,沉淀细胞,弃上清。
6)再用适量 JC-1 染色缓冲液()重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
核蛋白提取试剂盒(无去垢剂)100T使用说明书注意事项
1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
2PIpropidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4下操作,以免影响细胞状态。
5)在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
7PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首*行Annexin V-FITC染色,短可在上机前5分钟再加入PI染色。
IGFBP5 Protein Canine 重组狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 标签)

大鼠子宫成纤维细胞*培养基 100mL

APOA1 Others Mouse 小鼠 ApoA1 人细胞裂解液 (阳性对照)

Lec1仓鼠卵巢细胞 Lec1 Chinese hamster ovary cells MEMα培养基(GIBCO)+10%FBS

胰腺星状细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)

EBTr (NBL-4) (牛胚气管细胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠垂体细胞RPC
正常大鼠肾细胞;NRK-52E

CNTN3 Others Rat 大鼠 Contactin 3 / CNTN3 人细胞裂解液 (阳性对照)

人成纤维细胞*培养基 100mL

T6细胞,人舌癌细胞 * 大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E

CXCL14 Protein Human 重组人 CXCL14 / BRAK 蛋白

MRC-5(人胚肺成纤维细胞 ) 5×106cells/瓶×2 小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 人细胞裂解液 (阳性对照)
CXCL12 Others Cynomolgus 食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 人细胞裂解液 (阳性对照)

人真皮成纤维细胞-胎儿RNAHEF-f miRNA5 μg

THP-1 人单核细胞白血病细胞

CL-0418QGY-7703(人肝癌细胞)5×106cells/瓶×2

小鼠成纤维细胞(EGFP标记)

人男性正常细胞;Hs68 人结肠粘膜上皮细胞*培养基 100mL
大鼠可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

人*(GM1)抗体(IgG)免疫试剂盒 Human anti-ganglioside(GM1)antibody(IgG)ELISA Kit

MousehepatitisBviruseantigen,HBeAgELISAKit小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)ELISA试剂盒规格:96T/48T

Caspase10(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克

Humanmetanephrine,MNELISA试剂盒人变肾上腺素(MN)ELISA试剂盒规格:96T/48T

HumanPlaetassociatedantibody,PA-IgMELISAKit人血小板相关抗体IgM(PA-IgM)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人游离雌三醇(FE3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Rat cathepsin K (cath-K) ELISA Kit 大鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒

HumantumormarkerDR-70forlungcancer,DR-70TMELISAKit 人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanInterferonα/βReceptor,IFN-α/βRELISA试剂盒人α/β干扰素受体(IFN-α/βR)ELISA试剂盒规格:96T/48T

组织结构型神经元一氧化氮合成酶(cNOS//nNOS)活性荧光定量检测试剂盒20

HumanKallikrein10,KLK10ELISAKit人*10(KLK10)ELISA试剂盒规格:96T/48T
核蛋白提取试剂盒(无去垢剂)100T使用说明书大鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠白介素11(IL-11)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

 

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