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his标签蛋白纯化试剂盒5ml实验方法使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿*、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不*用于检测组织样本。
his标签蛋白纯化试剂盒5ml实验方法操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
his标签蛋白纯化试剂盒5ml实验方法实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时,注意必须*清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
CSF2 Protein Mouse 重组小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 标签)
人脐动脉平滑肌细胞*培养基 100mL
VASN Others Human 人 VASN / Vasorin 人细胞裂解液 (阳性对照)
3T3细胞,小鼠成纤维细胞 COLO 205(结肠癌细胞) 人肾透明细胞癌;Caki-1
人表皮黑色素细胞-浅色素RNAHEM-l miRNA5 μg
T-47D(人管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
视网膜色素上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
DDR2 Others Human 人 DDR2 Kinase / CD167b 人细胞裂解液 (阳性对照)
杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2C7
GLC-82细胞,人肺腺癌细胞 转S9基因仓鼠卵巢细胞,ZA6细胞 CL-0050Caco-2(人结直肠腺癌细胞)5×106cells/瓶×2
SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化细胞) 5×106cells/瓶×2
HCAEC-c 人冠状动脉内皮细胞(HCAEC) 500,000cells 滑膜细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
TNFRSF1A Others Rat 大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人细胞裂解液 (阳性对照)
人视网膜色素上皮细胞cDNAHRPEpiC cDNA
真皮成纤维细胞*培养基 100mL
WB-F344细胞,大鼠肝上皮样干细胞 HL-60(白血病原髓细胞) 大鼠肝细胞瘤;H4-II-E-C3
EFNA1 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 标签)
ZR-75-1(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 C3H/An小鼠结缔组织细胞(L929-TK-);LTK-
大鼠*型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人水通道蛋白3(AQP-3)免疫试剂盒 Human Aquaporin 3,AQP-3 ELISA Kit
MouseEstradiolreceptor,ERELISAKit小鼠雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒规格:96T/48T
RatVitaminC,VCELISA试剂盒大鼠维生素C(VC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISA试剂盒人巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanPentosidineELISAKit人戊糖素(Pentosidine)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人组织蛋白酶S(cath-S)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat lipoprotein alpha (Lp- alpha) ELISA Kit 大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒
Humananti-hepatitisBviruscoreIgM,HBc-IgMantibodyELISAKit 人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗体(HBcAb-IgM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanhemeoxygenase1,HO-1ELISA试剂盒人血红素氧合酶1(HO-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织钙离子浓度比色法定量检测试剂盒20次
Humanmastcelltryptase,MCISAKit人肥大细胞类*(MCT)ELISA试剂盒规格:96T/48T
his标签蛋白纯化试剂盒5ml实验方法大鼠信号转导分子(Smad1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠心磷脂抗体IgA(ACAIgA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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