血液蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）100T使用说明书 返回列表页

血液蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）100T使用说明书使用注意事项
1．微量试剂取用前请离心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿*、戴手套等。
4．本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不*用于检测组织样本。
血液蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）100T使用说明书操作方法
1．悬浮细胞离心（2000rpm离心5min）收集；贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次（2000rpm离心5min）收集1~5×105细胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混匀；室温、避光、反应5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞；
4．请在1 hour内，进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A．荧光显微镜观察
1．滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞；
2．对于贴壁细胞来说，也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡；
（1）将细胞于盖玻片上生长，用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，并设立阴性对照组；
（2）用PBS洗涤细胞两次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混匀；
（4）将上述溶液滴加于盖玻片表面，使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖；
（5）避光、室温反应5 min。
3．将盖玻片倒置于载玻片上，于荧光显微镜下观察激发波长546nm，发射波长647 nm，7-AAD荧光信号呈红色。
B．流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测，激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
血液蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）100T使用说明书实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2％的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时，注意必须*清除EDTA：在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤，清除EDTA，以免残余的EDTA与Ca2＋螯合，影响Annexin V的结合。
（1）用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer；
（2）细胞收集。悬浮细胞收集：离心5分钟；贴壁细胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化时间不宜过长，否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合），于室温2000rpm离心5～10分钟，收集细胞；
（3）细胞洗涤：用预冷1×PBS（4℃）重悬细胞一次，2000rpm离心5～10分钟，洗涤细胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞；
（5）Annexin V-FITC标记：加入5μL的Annexin V-FITC混匀后，避光，室温孵育15分钟；
（6）PI标记：上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
（7）上机前，补加200μL的1×Binding Buffer。
EFNA5 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 标签)

胎儿真皮成纤维细胞*培养基 100mL

EDA2R Others Rat 大鼠 XEDAR / EDA2R 人细胞裂解液 (阳性对照)

CFSC-3H & 5H细胞，大鼠肝星形细胞 SK-N-SH(神经母细胞瘤) 大鼠垂体瘤细胞;GH3

人绒毛间叶成纤维细胞cDNAHVMF cDNA

YAC-1(小鼠淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠肺腺癌细胞系;LA795
人表皮黑色素细胞-HEM-a

DAPK1 Others Human 人 DAPK1 / DAP Kinase 1 (aa 1-363) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

兔角膜后基质层成纤维细胞;RCBBF

Y1细胞，肾上腺皮质细胞 人胰腺癌细胞,MIApaca-2细胞 CM-M008小鼠支气管成纤维细胞*培养基100mL

大鼠骨肉瘤细胞;UMR-106

CDH4 Others Human 人 R-Cadherin / CDH4 人细胞裂解液 (阳性对照)
NOV Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells Transfected Lysate (positive control) (denatured)

人无色素睫状上皮细胞HNPCEpiC

恒河猴肾细胞;LLC-MK2

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化);PC-12(低分化) 肝癌细胞，BEL-7402细胞 D3细胞，129小鼠ES细胞

MiaPaCa-2, 人胰腺癌细胞 Human

CST4 Others Human 人 CST4 / Cystatin-4 / Cystatin-S 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

人瘦素(LEP)免疫试剂盒 Human Leptin,LEP ELISA kit

Mouseferritin,FEELISAKit小鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Ratα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISA试剂盒大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

HumanMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISA试剂盒人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒规格：96T/48T

HumanPeptidylprolylcis/transisomerase,PPIELISAKit人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人转录因子抗体-1(ATF-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human euglobulinlysis (EL) ELISA Kit 人优球蛋白(EL)ELISA试剂盒

Humanlowmolecularweightheparin,LMWHELISAKit 人低分子肝素(LMWH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

humanhepatitisBvirus,HBVpreS2AgELISA试剂盒人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBVpreS2Ag)ELISA试剂盒规格：96T/48T

组织*(GLUTATHIONE)总浓度荧光定量检测试剂盒50次

HumanMacrophageInflammatoryProtein-1β,MIP-1βELISAKit人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒规格：96T/48T
血液蛋白快速提取试剂盒（离心柱法，2D电泳用）100T使用说明书大鼠生长因子(GH)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠*(SS)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装