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冻存细胞蛋白提取试剂盒100T实验方法EFNB1 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 标签)
人皮下脂肪细胞*培养基 100mL
IFNA4 Others Rat 大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 人细胞裂解液 (阳性对照)
C2C12细胞,鼠肌原细胞 H08910(卵巢癌细胞) 大鼠胰岛细胞瘤细胞;INS-1
人主动脉平滑肌细胞cDNAHASMC cDNA
ZR-75-30(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH2
冻存细胞蛋白提取试剂盒100T实验方法使用注意事项
1.微量试剂取用前请 离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿*、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不*用于检测组织样本。
冻存细胞蛋白提取试剂盒100T实验方法操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
冻存细胞蛋白提取试剂盒100T实验方法实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时,注意必须*清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
CL-0467WPMY-1(人正常前列腺基质永生化细胞)5×106cells/瓶×2
CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠虹膜色素上皮细胞*培养基 100mL
U-373MG人脑神经胶质瘤细胞 U-373MG glioma cells DMEM+10% FBS
IL1B Protein Rabbit 重组兔 IL-1 beta / IL1B 蛋白
NCI-H358(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 PC-12(肾上腺嗜铬细胞瘤细胞)
FSTL1 Others Mouse 小鼠 FSTL1 人细胞裂解液 (阳性对照)
人纤维环细胞HAFC
大额牛与婆罗门牛杂交F1代皮肤成纤维样细胞;BOS-6
大鼠骨肉瘤细胞;UMR-106 肺腺癌细胞,LTEP-a-2细胞 MSCS细胞,猴的骨髓间充质干细胞
PANC-1, 人胰腺癌细胞 Human
IFNAR2 Others Human 人 IFNAR2 / IFNABR 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠脑红蛋白(NGB)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人受体型*蛋白磷酸酶样N(PTPRN)免疫试剂盒 Human PTPRN ELISA Kit
MouseFibrinogen,FbgELISAKit小鼠血纤蛋白原(Fbg)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Ratα1-microglobulin,α1-MGELISA试剂盒大鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISA试剂盒人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanpeptidylprolylisomerase(cyclophilin)-like1,PPIL1ELISAKit人肽酰脯氨酰异构酶(亲环蛋白)样1(PPIL1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human Helicobacter pylori IgG (Hp-IgG) ELISA Kit 人幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒
Humananti-livercytosolantibodytype1,LC1ELISAKit 人抗肝细胞胞质1型抗体(LC1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanHepatitisCvirusIgM,HCV-IgMELISA试剂盒人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织*S转移酶(GSHST)总活性酶动力比色法定量检测试剂盒20次
Humanmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒规格:96T/48T
冻存细胞蛋白提取试剂盒100T实验方法大鼠上腺素能a1A受体(ADRA1A)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠上腺素(EPI)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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