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藻类膜蛋白提取试剂盒(2D电泳)100T使用说明书实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
藻类膜蛋白提取试剂盒(2D电泳)100T使用说明书注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首*行Annexin V-FITC染色,短可在上机前5分钟再加入PI染色。
EFNA5 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)
人软骨细胞*培养基 100mL
CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人细胞裂解液 (阳性对照)
L929细胞,小鼠肺成纤维细胞 SGC7901(胃腺癌细胞) 大鼠脑胶质瘤细胞;C6
人肾系膜细胞cDNAHRMC cDNA
801-D (人巨细胞性肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 仓鼠/小鼠杂交瘤细胞;145-2C11
小鼠胚胎成纤维细胞;NIH/3T3
CXCL16 Others Canine 狗 CXCL16 / SR-PSOX 人细胞裂解液 (阳性对照)
Caco-2,人结直肠腺癌细胞
NEI-H209细胞,小细胞肺癌细胞 人前列腺癌细胞,22RV1细胞 人脉络丛成纤维细胞RNAHCPF miRNA5 μg
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B
ERBB3 Others Human 人 ErbB3 / HER3 人细胞裂解液 (阳性对照)
CLEC7A Others Human 人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人细胞裂解液 (阳性对照)
人小胶质细胞裂解物HML
人胃癌细胞;MKN-45
小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02 透明质酸酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL
A549/DDP, 人肺腺癌耐药细胞株 Human
PLA2G1B Others Human 人 PLA2G1B / PLA2 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠脑啡肽(ENK)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人受体TNFRSF结合**激酶2(RIPK2)免疫试剂盒 human receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2,RIPK2 ELISA Kit
MouseFibronectin,FNELISAKit小鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Ratα-Glucosidase,a-GluELISA试剂盒大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/HLAⅠELISA试剂盒人主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanPerforin/Pore-formingprotein,PF/PFPELISAKit人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人转化生长因子α(TGF-α)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human free female three alcohol (FE3) ELISA Kit 人游离雌三醇(FE3)ELISA试剂盒
Humanhepaticlipase,HLELISAKit 人肝脂酶(HL)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanHepatitisDvirusIgM,HDVIgMELISA试剂盒人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织*过氧化物酶(GSHPX)活性酶动力比色法定量检测试剂盒20次
HumanMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISAKit人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
藻类膜蛋白提取试剂盒(2D电泳)100T使用说明书大鼠神经激肽A(NKA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠*状腺原酸(T3)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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