GST标签蛋白纯化试剂盒10ml实验方法 返回列表页

GST标签蛋白纯化试剂盒10ml实验方法使用注意事项
1．微量试剂取用前请离心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿*、戴手套等。
4．本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不*用于检测组织样本。
GST标签蛋白纯化试剂盒10ml实验方法操作方法
1．悬浮细胞离心（2000rpm离心5min）收集；贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次（2000rpm离心5min）收集1~5×105细胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混匀；室温、避光、反应5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞；
4．请在1 hour内，进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A．荧光显微镜观察
1．滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞；
2．对于贴壁细胞来说，也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡；
（1）将细胞于盖玻片上生长，用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，并设立阴性对照组；
（2）用PBS洗涤细胞两次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混匀；
（4）将上述溶液滴加于盖玻片表面，使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖；
（5）避光、室温反应5 min。
3．将盖玻片倒置于载玻片上，于荧光显微镜下观察激发波长546nm，发射波长647 nm，7-AAD荧光信号呈红色。
B．流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测，激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
GST标签蛋白纯化试剂盒10ml实验方法实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2％的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时，注意必须*清除EDTA：在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤，清除EDTA，以免残余的EDTA与Ca2＋螯合，影响Annexin V的结合。
（1）用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer；
（2）细胞收集。悬浮细胞收集：离心5分钟；贴壁细胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化时间不宜过长，否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合），于室温2000rpm离心5～10分钟，收集细胞；
（3）细胞洗涤：用预冷1×PBS（4℃）重悬细胞一次，2000rpm离心5～10分钟，洗涤细胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞；
（5）Annexin V-FITC标记：加入5μL的Annexin V-FITC混匀后，避光，室温孵育15分钟；
（6）PI标记：上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
（7）上机前，补加200μL的1×Binding Buffer。
EFNB1 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 标签)

人破骨细胞*培养基 100mL

ERBB3 Others Rat 大鼠 HER3 / ErbB3 人细胞裂解液 (阳性对照)

PA317细胞，小鼠胚成纤维包装细胞 6T-CEM(T细胞白血病) 大鼠肾小球系膜细胞;HBZY-1

人肺动脉平滑肌细胞cDNAHPASMC cDNA

A-427(人肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠T淋巴细胞;Cl.Ly1+2-/9
CL-0383MDA-MB-436(人癌细胞)5×106cells/瓶×2

CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR / CAR 人细胞裂解液 (阳性对照)

人角膜上皮细胞总RNAHCEpiC tRNA

ZR75-1细胞，人癌细胞 129小鼠ES细胞,D3细胞 WM35, 人黑色素瘤细胞

MV3(人黑色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2

HUAEC Pellet 人脐动脉内皮细胞团块 > 1 mio.cells 神经细胞培养基NM-prf
CD68 Others Rat 大鼠 CD68 / Macrosialin 人细胞裂解液 (阳性对照)

人小胶质细胞总RNAHM tRNA

人真皮淋巴上皮细胞*培养基 100mL

COS-7细胞，SV40转化的非洲绿猴肾细胞 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚肾细胞) 杂交瘤(B类);Z1510C6D10F4G6

EFNB2A Protein Danio rerio (zebrafish) 重组斑马鱼 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (His 标签)

Vero(非洲绿猴肾细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-L1
大鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)免疫试剂盒 Human eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit

MouseFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit小鼠FMS样*激酶3(Flt3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Ratβ2-glycoprotein1antibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISA试剂盒大鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISA试剂盒规格：96T/48T

HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/HLA-ⅢELISA试剂盒人主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Humanpermeabilityglycoprotein,P-gpELISAKit人P糖蛋白/渗透性糖蛋白(P-gp)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human free testosterone (F-TESTO) ELISA Kit 人游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒

Humancarcinoembryonicantign,CEAELISAKit 人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

humanhepatitisEvirusIgG,HEV-IgGELISA试剂盒人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

组织*还原酶活性比色法定量检测试剂盒20次

HumanLysozyme，LZMELISAKit人*(LZM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
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