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固定细胞蛋白提取试剂盒100T使用说明书实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
固定细胞蛋白提取试剂盒100T使用说明书注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首*行Annexin V-FITC染色,短可在上机前5分钟再加入PI染色。
EFNA4 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (His 标签)
人脑膜细胞*培养基 100mL
NRG1 Others Human 人 NRG1-beta 1 (ECD) 人细胞裂解液 (阳性对照)
MC53细胞,小鼠肾系膜细胞 RD(恶性胚胎横纹肌瘤) 猫肾细胞;F81
人肝内胆管上皮细胞裂解物HIBEpiCL
BGC-803(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2 转PYTL基因小鼠支持细胞;15P-1
人肺间充质干细胞裂解物HPMSCL
CTRL Others Human 人 CTRL-1 / CTRL / Chymotrypsin-like protease 人细胞裂解液 (阳性对照)
615小鼠癌瘤株;Ca759
L-02细胞,正常人肝细胞 人APP-PS1(M146L)双基因转染CHO细胞株,7WML6.0细胞 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA
LLC(小鼠肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-77110 Mitsuhashi/Maramorosh InsectMedium昆虫细胞培养基 500ml
FLRT1 Others Human 人 FLRT1 人细胞裂解液 (阳性对照)
人小脑星形胶质细胞HA-c
L6 大鼠成肌细胞
CM-H051人胎盘滋养层细胞*培养基100mL
SK-N-SH, 人神经母细胞瘤细胞
人成骨肉瘤细胞;Saos-2 人脉络膜微血管细胞*培养基 100mL
大鼠内皮抑素(ES)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人*免疫试剂盒 Human Retinoic Acid ELISA Kit
MouseFollistatin,FSELISAKit小鼠卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Ratβ-Thromboglobulin,β-TGELISA试剂盒大鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanmammaliantargetofrapamyein,mTORELISA试剂盒人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit人过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人相关抗原(TAA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human estrogen / progesterone (PROG) ELISA Kit 人孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒
humanlungcancerMarkerELISAKit 人肺癌标志物ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanHighdensitylipoproteincholesterol,HDL-CELISA试剂盒人高密度脂蛋白*(HDL-C)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织过氧化物酶(peroxidase)活性比色法定量检测试剂盒20次
HumanLuteinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISAKit人黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
固定细胞蛋白提取试剂盒100T使用说明书大鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶2(UGT2)ELISA试剂盒 96T/48T 96T/48T 组装/原装
大鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1(UGT1)ELISA试剂盒 96T/48T 96T/48T 组装/原装
大鼠尿蛋白(UP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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