总蛋白提取试剂盒（2D电泳用）50T实验方法 返回列表页

总蛋白提取试剂盒（2D电泳用）50T实验方法使用注意事项
1．微量试剂取用前请离心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿*、戴手套等。
4．本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不*用于检测组织样本。
总蛋白提取试剂盒（2D电泳用）50T实验方法操作方法
1．悬浮细胞离心（2000rpm离心5min）收集；贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次（2000rpm离心5min）收集1~5×105细胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混匀；室温、避光、反应5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞；
4．请在1 hour内，进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A．荧光显微镜观察
1．滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞；
2．对于贴壁细胞来说，也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡；
（1）将细胞于盖玻片上生长，用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，并设立阴性对照组；
（2）用PBS洗涤细胞两次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混匀；
（4）将上述溶液滴加于盖玻片表面，使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖；
（5）避光、室温反应5 min。
3．将盖玻片倒置于载玻片上，于荧光显微镜下观察激发波长546nm，发射波长647 nm，7-AAD荧光信号呈红色。
B．流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测，激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
总蛋白提取试剂盒（2D电泳用）50T实验方法实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2％的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时，注意必须*清除EDTA：在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤，清除EDTA，以免残余的EDTA与Ca2＋螯合，影响Annexin V的结合。
（1）用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer；
（2）细胞收集。悬浮细胞收集：离心5分钟；贴壁细胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化时间不宜过长，否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合），于室温2000rpm离心5～10分钟，收集细胞；
（3）细胞洗涤：用预冷1×PBS（4℃）重悬细胞一次，2000rpm离心5～10分钟，洗涤细胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞；
（5）Annexin V-FITC标记：加入5μL的Annexin V-FITC混匀后，避光，室温孵育15分钟；
（6）PI标记：上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
（7）上机前，补加200μL的1×Binding Buffer。
EFNA1 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 标签)

人神经少突起前质胶质细胞*培养基 100mL

VTCN1 Others Human 人 B7-H4 / B7S1 / B7x 人细胞裂解液 (阳性对照)

JB6-C30细胞，小鼠皮肤细胞 J82(膀胱癌细胞) 犬肾细胞;MDCK/IgR

人骨骼肌成肌细胞裂解物HSkMML

CAL-27(人舌鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 原代骨细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装：1ml
小鼠淋巴瘤细胞;P388D1(IL-1)

CTRC Others Human 人 CTRC / chymotrypsin C 人细胞裂解液 (阳性对照)

Calu-6 人退行性癌细胞

PANC-1人胰腺癌细胞 Human pancreatic cancer cell line PANC-1 DMEM+10% FBS

坏死因子

人主动脉内皮细胞 (HAEC)( 5×105 ) BRL 3A, 大鼠肝正常细胞 Rattus
CNTFR Others Rat 大鼠 CNTFR / CNTFR-alpha 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人小气道上皮细胞HSAEpiC

猪肾细胞;PK-15

R 1610细胞，中国仓鼠体细胞 人胰腺癌细胞,PC-3细胞 CM-R101大鼠脑动脉血管平滑肌细胞*培养基100mL

大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-2H3

IL4R Others Human 人 IL4R / CD124 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠白介素3(IL3)ELISA试剂盒 ，英文名： IL3 ELISA Kit

人*结合蛋白(RBP)ELISA检测试剂盒HumanRetinolbindingprotein,RBPELISAKit 96T/48T

大鼠抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)免疫试剂盒 Rat anti-Endomysial Antibody IgA,EMA IgA ELISA Kit

英文名称RatC5aELISAKit大鼠补体片断C5a(C5a)规格：96T/48T

酒类氨荧光定量检测试剂盒20次

ELISAKitBRCA-1人癌易感蛋白1规格：48T/96T
人特异生长因子/相关因子(TSGF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human progesterone receptor (PGR) ELISA Kit 人孕酮受体(PGR)ELISA试剂盒

humanPepsinogenA,PG-AELISAKit 人*原A(PG-A)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanhighmobilitygroupprotein17,HMG-17ELISA试剂盒人高速泳动蛋白17(HMG-17)ELISA试剂盒规格：96T/48T

组织琥珀酸脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂盒20次

HumanLungresistance-relatedprotein,LRPELISAKit人肺耐药蛋白(LRP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
总蛋白提取试剂盒（2D电泳用）50T实验方法大鼠内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

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