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固定细胞蛋白提取试剂盒50T免费代测使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿*、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不*用于检测组织样本。
固定细胞蛋白提取试剂盒50T免费代测操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
固定细胞蛋白提取试剂盒50T免费代测实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时,注意必须*清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
EFNA3 Protein Human 重组人 Ephrin-A3 / EFNA3 / EFL2 蛋白 (Fc 标签)
人晶状体上皮细胞*培养基 100mL
EPCAM Others Rat 大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 人细胞裂解液 (阳性对照)
NRK-52E细胞,大鼠肾细胞 HEL(红白血病细胞) 猪肾细胞;PK-15
人小脑颗粒细胞裂解物HCGCL
D283 Med(人脑髓母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 肠粘膜上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
人脐动脉内皮细胞
CTF1 Others Human 人 Cardiotrophin-1 / CTF1 人细胞裂解液 (阳性对照)
人心肌细胞RNAHCM miRNA5 μg
兔角膜后基质层成纤维细胞;RCBBF 肺癌细胞,A549[A-549]细胞 145-2C11细胞,仓鼠/小鼠杂交瘤细胞
人肾皮质近曲小管上皮细胞;HK-2
HA Others H10N3 甲型流感 H10N3 (A/duck/Hong Kong/786/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
PTGFRN Others Cynomolgus 食蟹猴 EWI-F / PTGFRN 人细胞裂解液 (阳性对照)
人小细胞肺癌细胞;NCI-H209
CL-0449SW 780(人膀胱移行细胞癌)5×106cells/瓶×2
2BS细胞,胚肺细胞 人前列腺癌细胞,VLcop细胞 人肾小管上皮细胞;HKC
猕猴皮肤细胞;MMS7
TNFRSF21 Others Human 人 DR6 / TNFRSF21 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠内皮素1(ET-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人*(SS)免疫试剂盒 Human Somatostatin,SS ELISA Kit
MouseFreeTestoterone,F-TESTOELISAKit小鼠游离睾同(F-TESTO)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Salmoncalcitonin,SCISA试剂盒*(SCT)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanMannmabindinglectinreceptor,MBLRELISA试剂盒人甘露糖凝集素受体(MBLR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanphosphatidylserine,PSELISAKit人磷脂酰*(PS)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human mucin / mucin 5AC (MUC5AC) ELISA Kit 人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒
HumanCyclin-D1ELISAKit 人细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
humanHistocompatibility2-K1-Kregion,H2-K1ELISA试剂盒人组织相容性2-K1-K区(H2-K1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织环氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1)活性比色法定量检测试剂盒20次
Humanlow-densitylipoprotein-receptor-relatedprotein,LRP-6ELISAKit人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)ELISA试剂盒规格:96T/48T
固定细胞蛋白提取试剂盒50T免费代测大鼠磷酸化基末端蛋白激酶(P-JNK)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠淋巴细胞因子ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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