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组织蛋白快速提取试剂盒(离心柱法)100T免费代测实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
组织蛋白快速提取试剂盒(离心柱法)100T免费代测注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首*行Annexin V-FITC染色,短可在上机前5分钟再加入PI染色。
EFNB1 Protein Human 重组人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 标签)
人角膜成纤维细胞*培养基 100mL
BCAM Others Rat 大鼠 BCAM 人细胞裂解液 (阳性对照)
CT-26.WT细胞,小鼠大肠癌细胞 CBRH-7919(大鼠肝癌细胞) 大额牛皮肤成纤维样细胞;BOS-2
一氧化氮色标法检测试剂盒NO
H-97(人高转移肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 肺微血管内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
小鼠黑质神经元MN-sn
CST3 Others Rat 大鼠 CST3 / Cystatin-C / Cystatin-3 人细胞裂解液 (阳性对照)
HEL1 人胚肺成纤维样细胞(男)
CM-R075大鼠主动脉内皮细胞*培养基100mL
MGC80-3(MGC-803)人胃癌细胞
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0923 人脑动脉血管内皮细胞*培养基 100mL
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)(5×105)
人心肌细胞-cDNAHCM-a cDNA
大鼠骨髓瘤细胞;IR983F
杂交瘤(B类);Z153A2A5B3A12 小鼠牙细胞*培养基 100mL
LX-2, 人肝星形细胞株 Human
CTLA4 Others Mouse 小鼠 CTLA4 / CD152 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠内皮素(ET)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)免疫试剂盒 Human growth hormone releasing peptide-Ghrelin,GHRP-Ghrelin ELISA Kit
MouseFreeThyroxine,FT4ELISAKit小鼠游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
SheepComplementfragment3brccptor,C3bRELISA试剂盒绵羊补体片段3b受体(C3bR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanMannmabindingprotein/mannanbindinglectin,MBP/MBLELISA试剂盒人甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素(MBP/MBL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人坏死因子α转化酶(TACE)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human integrin alpha v beta 3 (Integrin alpha v beta 3) ELISA Kit 人整合素αⅤβ3(Integrin αⅤβ3)ELISA试剂盒
HumanHeatShockProtein40,HSP-40ELISAKit 人热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanHomocysteicacid,HcyELISA试剂盒人同型半*(Hcy)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织环氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性荧光定量检测试剂盒20次
HumanLongactingthyroidstimulator,LATSELISAKit人*甲状腺刺激素(LATS)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织蛋白快速提取试剂盒(离心柱法)100T免费代测大鼠可溶性白细胞分化抗原14(sCD14)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠可溶性Toll样受体6(sTLR6)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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