乳清蛋白提取试剂盒100T实验方法 返回列表页

乳清蛋白提取试剂盒100T实验方法实验操作步骤：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ，其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推；对于细胞悬液每50～100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液（5 ×），混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置：
    把试剂盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中，稀释至10uM ，处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ，进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞，通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失，JC-1 染色后观察应呈绿色荧光；而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞，CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同，需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞：
（1）取 10～60 万细胞，重悬于 0.5mL 细胞培养液中，细胞培养液中可以含血清和酚红。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
（3）在孵育期间，按照每 1mL JC-1 染色缓冲液（5×）加入 4mL 蒸馏水的比例，配制适量的JC-1 染色缓冲液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育结束后，600g 4 ℃离心3 ～4 分钟，沉淀细胞。弃上清，注意尽量不要吸除细胞。
（5）用JC-1 染色缓冲液（1×）洗涤 2 次：加入 1mL JC-1 染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g 4 ℃离心3～4 分钟，沉淀细胞，弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g 4 ℃离心 3～4 分钟，沉淀细胞，弃上清。
（6）再用适量 JC-1 染色缓冲液（1×）重悬后，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察，也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
乳清蛋白提取试剂盒100T实验方法注意事项
（1）本试剂只适用于实验，不适用于临床检测；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙锭）有毒性，能通过皮肤吸收，对眼睛有刺激作用，使用时需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。在处理和标记时，尽可能在暗处进行。在孵育阶段，用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后，在暗室内用显微镜观察；
（4）整个操作过程动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞，尽量在4℃下操作，以免影响细胞状态。
（5）在细胞洗涤的后一步，请尽量将上清弃净，以免PBS残留，有可能会影响实验结果。
（6）为防止荧光衰变，宜在1小时内进行流式检测。
（7）PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高，建议首*行Annexin V-FITC染色，短可在上机前5分钟再加入PI染色。
表皮生长因子

大鼠肺微血管内皮细胞*培养基 100mL

TNFSF9 Others Rat 大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 人细胞裂解液 (阳性对照)

A9细胞，小鼠皮下结缔组织细胞 HCC1428(人癌细胞) 非洲绿猴肾细胞系/HCV-C;Vero-HCV-C

星形细胞生长添加物SteCGS

Ishikawa(人子宫内膜癌细胞) 5×106cells/瓶×2 滑膜细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
脑膜细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

CSNK2A1 Others Human 人 CSNK2A1 / CK2A1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 [RAW264.7

CHO/dhFr-细胞，中国仓鼠二氢*还原酶缺陷细胞 人肝癌细胞,HuH-7细胞 CL-0144LoVo(人大肠癌细胞)5×106cells/瓶×2

中国仓鼠肺细胞;V79

AXL Others Mouse 小鼠 Axl Kinase 人细胞裂解液 (阳性对照)
IL1RL1 Others Human 人 IL1RL1 / ST2 ( isoform A ) 人细胞裂解液 (阳性对照)

人心脏成纤维细胞cDNAHCF cDNA

4179 长尾绿猴胚胎细胞

CL-0271D283 Med(人脑髓母细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2

rCSC, 大鼠心肌细胞

人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293);APP-PS1 人支持细胞*培养基 100mL
大鼠末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

人生长激素(GH)免疫试剂盒 Human growth hormone,HGH ELISA KIT

MouseGastrointestinalcancerMarker-CA199ELISAKit小鼠胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒规格：96T/48T

SheepInterleukin2,IL-2ELISA试剂盒绵羊白介素2(IL-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Humanmastcelltryptase,MCISA试剂盒人肥大细胞类*(MCT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

humanphosphofructokinase-plaet,PFKPELISAKit人血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human lipoprotein lipase (LPL) ELISA Kit 人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒

HumanHistoneDeacetylase,HDELISAKit 人组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanHyaluronidase,HAaseELISA试剂盒人透明质酸酶(HAase)ELISA试剂盒规格：96T/48T

组织肌酐(CREATININE)酶连续反应比色法定量检测试剂盒20次

Humanlipoteichoicacids,LTAELISAKit人脂磷壁酸(LTA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
乳清蛋白提取试剂盒100T实验方法大鼠抗促甲状腺素受体抗体(TRAb)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠抗IVIgG抗体ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠抗IgE受体抗体ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

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