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溶酶体蛋白提取试剂盒50T免费代测使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿*、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不*用于检测组织样本。
溶酶体蛋白提取试剂盒50T免费代测操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
溶酶体蛋白提取试剂盒50T免费代测实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时,注意必须*清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
NRG1 Protein Canine 重组狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 标签)
大鼠气管上皮细胞*培养基 100mL
CA9 Others Canine 狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 人细胞裂解液 (阳性对照)
CRFK细胞,猫肾细胞 SK-HEP-1(人肝癌细胞) 猕猴肺细胞;MML2
角质细胞生长添加物KGS
M14(人黑色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 颅盖造骨细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
心肌细胞Many types of cells包装:5 ×105次方(1ml)
CSNK1A1 Others Human 人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12]
MDA-MB-231细胞,癌细胞 人肝癌细胞,Bel-7402细胞 CL-00086T-CEM (人T细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2
仓鼠源细胞
CDH8 Others Human 人 Cadherin-8 人细胞裂解液 (阳性对照)
CD276 Others Mouse 小鼠 B7-H3 / CD276 人细胞裂解液 (阳性对照)
人心脏成纤维细胞-心房裂解物HCF-aa L
小鼠单核巨噬细胞;J774A.1
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-1A3 IV型胶原酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL
AGS人胃腺癌细胞 Human
TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠苗条素受体(LR/Ob-R)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人生长分化因子2(GDF2)免疫试剂盒 human growth differentiation factor 2,GDF2 ELISA Kit
Mouseghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Sheepmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISA试剂盒绵羊主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanMatrixGlaProtein,MGPELISA试剂盒人基质γ羧基*蛋白(MGP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
humanphospho-inhibitorysubunitofNF-κBα,pIKBαELISAKit人磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人脂磷壁酸(LTA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human adipose differentiation related protein (ADRP) ELISA Kit 人脂肪分化相关蛋白(ADRP)ELISA试剂盒
HumanHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit 人热休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanhydroxylysine,HylELISA试剂盒人羟赖氨酸(Hyl)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织肌酸激酶(CK)总活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次
Humanlipoproteinlipase,LPLELISAKit人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
溶酶体蛋白提取试剂盒50T免费代测大鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠睫状神经营养因子(CNTF)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠结缔组织生长因子(CTGF)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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