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高尔基体蛋白提取试剂盒50T售后服务实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
高尔基体蛋白提取试剂盒50T售后服务注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首*行Annexin V-FITC染色,短可在上机前5分钟再加入PI染色。
NRG1 Protein Canine 重组狗 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 标签)
大鼠肺成纤维细胞*培养基 100mL
CDCP1 Others Mouse 小鼠 CDCP1 人细胞裂解液 (阳性对照)
CTLA4 Ig-24细胞,中国仓鼠卵巢细胞 SK-OV-3 [SKOV-3](人卵巢癌细胞) CM-H002人肺大动脉内皮细胞*培养基100mL
间充质干细胞脂肪细胞分化培养基MADM-prf
MDA-MB-435(人癌高转移细胞) 5×106cells/瓶×2 脑动脉血管平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
615小鼠树突状细胞肉瘤瘤株;DCS
CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
CM-M033小鼠肝实质细胞*培养基100mL
WM451, 人黑色素瘤细胞 导管瘤细胞,BT474细胞 VERO(非洲绿猴肾细胞)
小鼠胚胎成纤维细胞;C3H 10T1/2 2A6
LRPAP1 Others Human 人 LRPAP1 / A2MRAP 人细胞裂解液 (阳性对照)
C7 Others Human 人 C7 / Complement component 7 人细胞裂解液 (阳性对照)
人心脏成纤维细胞裂解物HCFL
人脑静脉血管平滑肌细胞*培养基 100mL
MES-13细胞,小鼠肾小球系膜细胞 K562(慢性髓原白血病) 豚鼠肺细胞;GP-F1
EFNA4 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签)
BE(2)-M17(人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纤维细胞;PA317
大鼠去甲(NE)ELISA试剂盒 ,英文名: NE ELISA Kit
人生长调节致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA检测试剂盒Humangrowth-regulatedoncogeneγ/melanomagrowthstimulatingactivity,GROγ/MGSAELISAKit 96T/48T
鱼ELISA试剂盒
CLIAKitforPhaseolusvulgarisagglutinin,PHAELISAKit菜豆凝集素规格:48T/96T
食物氨含量光谱法定量检测试剂盒20次
ELISAKitCCK人胆囊收缩素/肠促*肽规格:48T/96T
人脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human fatty acid binding protein (FABP) ELISA Kit 人脂肪酸结合蛋白(FABP)ELISA试剂盒
Humannitricoxide,NOELISAKit 人血清一氧化氮(NO)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanHydroxyproline-RichGlycoprotein,HRGPELISA试剂盒人羟*糖蛋白(HRGP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织肌酸激酶同工酶混合型(CK-MB)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次
Humanlipolysaccharidebindingprotein,LBPELISAKit人脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
高尔基体蛋白提取试剂盒50T售后服务大鼠胶原酶I(CollagenaseI)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠降钙素原(PCT)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠降钙素受体(CTR)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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