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酵母膜蛋白提取试剂盒(2D电泳用)100T实验方法实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
酵母膜蛋白提取试剂盒(2D电泳用)100T实验方法注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首*行Annexin V-FITC染色,短可在上机前5分钟再加入PI染色。
BTC Protein Human 重组人 BTC / Betacellulin 蛋白 (Fc 标签)
大鼠肺动脉成纤维细胞*培养基 100mL
CANT1 Others Human 人 CANT1 人细胞裂解液 (阳性对照)
ROS1728 大鼠成骨细胞 Osteoblasts of ROS1728 rats EMEM +10 FBS
上皮细胞培养基MEpiCM
MV3(人黑色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
T-104BII型胶原酶(含100mL酶解缓冲液)10mL
CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照)
星形细胞生长添加物AGS
TE 354.T细胞,人皮肤基底细胞癌 人胚肾细胞,AAV-293细胞 原代单核细胞培养特制添加剂Many types of cells包装:5/2.5/1ml
盘羊皮肤细胞;ASHS3
S100A1 Others Human 人 S100A1 人细胞裂解液 (阳性对照)
HBEGF Others Human 人 HBEGF / DTR 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人星形胶质细胞裂解物HAL
人结直肠腺癌细胞;SW620 [SW 620;SW-620]
HCC 94[HCC941122]细胞,子宫鳞癌细胞(高分化) 人低分化胃癌细胞,SGC7901细胞 猪肾细胞;PK(15)
tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02-CAG-tTA-2D1
DKK3 Others Mouse 小鼠 Dkk-3 / DKK3 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠游离*状腺原酸(Free-T3)ELISA试剂盒 ,英文名: Free-T3 ELISA Kit
人肾损伤分子1(Kim-1)ELISA检测试剂盒HumanKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 96T/48T
大鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(sIL-1RⅡ)免疫试剂盒 Rat soluble interleukin-1 receptor Ⅱ,sIL-1RⅡ ELISA kit
CLIAKitforTdT(Humanterminaldeoxynucleotidyltransferase)ELISAKit人末端脱氧核苷酸转移酶规格:48T/96T
人体HemoglobinERFLP基因分析试剂盒20次
ELISAKitanti-HAV人抗甲型肝炎病毒IgG抗体规格:48T/96T
人脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human neutrophilic alkaline phosphatase (NAP) ELISA Kit 人中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)ELISA试剂盒
Humanpigmentepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit 人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanICEprotease-activatingfactor,IRAPELISA试剂盒人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织基质金属蛋白酶3H同位素标记检测试剂盒(不包括同位素)20次
HumanleukotrieneE4,LT-E4ELISAKit人白三烯E4(LTE4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
酵母膜蛋白提取试剂盒(2D电泳用)100T实验方法大鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶(MMP-8)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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