磷酸酶抑制剂混合物片剂20片实验方法 返回列表页

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磷酸酶抑制剂混合物片剂20片实验方法实验操作步骤：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ，其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推；对于细胞悬液每50～100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液（5 ×），混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置：
    把试剂盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中，稀释至10uM ，处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ，进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞，通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失，JC-1 染色后观察应呈绿色荧光；而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞，CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同，需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞：
（1）取 10～60 万细胞，重悬于 0.5mL 细胞培养液中，细胞培养液中可以含血清和酚红。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
（3）在孵育期间，按照每 1mL JC-1 染色缓冲液（5×）加入 4mL 蒸馏水的比例，配制适量的JC-1 染色缓冲液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育结束后，600g 4 ℃离心3 ～4 分钟，沉淀细胞。弃上清，注意尽量不要吸除细胞。
（5）用JC-1 染色缓冲液（1×）洗涤 2 次：加入 1mL JC-1 染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g 4 ℃离心3～4 分钟，沉淀细胞，弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g 4 ℃离心 3～4 分钟，沉淀细胞，弃上清。
（6）再用适量 JC-1 染色缓冲液（1×）重悬后，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察，也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
磷酸酶抑制剂混合物片剂20片实验方法注意事项
（1）本试剂只适用于实验，不适用于临床检测；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙锭）有毒性，能通过皮肤吸收，对眼睛有刺激作用，使用时需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。在处理和标记时，尽可能在暗处进行。在孵育阶段，用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后，在暗室内用显微镜观察；
（4）整个操作过程动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞，尽量在4℃下操作，以免影响细胞状态。
（5）在细胞洗涤的后一步，请尽量将上清弃净，以免PBS残留，有可能会影响实验结果。
（6）为防止荧光衰变，宜在1小时内进行流式检测。
（7）PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高，建议首*行Annexin V-FITC染色，短可在上机前5分钟再加入PI染色。
HBEGF Protein Human 重组人 HBEGF / DTR 蛋白

大鼠淋巴成纤维细胞*培养基 100mL

EPHA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphA4 人细胞裂解液 (阳性对照)

MC38小鼠结肠癌细胞 MC38 mouse colon cancer cells DMEM+10%FBS

小鼠垂体细胞MPC

TE-13(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 心肌成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
小鼠间充质干细胞-骨髓MMSC-bm

CSF1 Others Human 人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 人细胞裂解液 (阳性对照)

HAN 人羊膜细胞

CM-R107大鼠海马神经元细胞*培养基100mL

Raji，人Burkitt's淋巴瘤细胞

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0919 人成骨细胞*培养基 100mL
NT5E Others Rat 大鼠 CD73 / NT5E 人细胞裂解液 (阳性对照)

人羊膜间充质基质细胞

人胚肺二倍体细胞;KMB-17

A498细胞，人肾癌细胞系 蝙蝠肺细胞,Tb 1 Lu细胞 CL-0430RS1(大鼠皮肤成纤维样细胞)5×106cells/瓶×2

EA.hy926(人脐静脉细胞融合细胞) 5×106cells/瓶×2

hMoCD14+-PB-c single donorpre-screened 外周血来源的人类CD14+单核细胞，单一来源，预选型 10 million 人结膜成纤维细胞HConF
大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒 ，英文名： Lp-α ELISA Kit

人肾上腺皮质抗体(ACA)ELISA检测试剂盒Humanadrenalcortexantibody,ACAELISAKit 96T/48T

大鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)免疫试剂盒 Rat Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule,ALCAM ELISA Kit

CLIAKitforTie1(Humantyrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains1)ELISAkit人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域*激酶1规格：48T/96T

全组织衰老特异性早期脂褐素苏丹黑原位染色试剂盒10次

ELISAKitAPSA人抗磷脂酰*抗体规格：48T/96T
人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human tumor necrosis factor beta (TNF- beta) ELISA Kit 人坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒

HumanMethylaseELISAKit 人甲基化酶(Methylase)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGHELISA试剂盒人免疫反应性生长激素(irGH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

组织基质金属蛋白酶(MMP-2)琥珀酰明胶法比色定量检测试剂盒20次

HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit人白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
磷酸酶抑制剂混合物片剂20片实验方法大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠骨保护素(OPG)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠*巯基转移酶（GST）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠*过氧化酶（GSH-Px）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装