包涵体溶解液50ml实验方法 返回列表页

包涵体溶解液50ml实验方法实验操作步骤：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ，其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推；对于细胞悬液每50～100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液（5 ×），混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置：
    把试剂盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中，稀释至10uM ，处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ，进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞，通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失，JC-1 染色后观察应呈绿色荧光；而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞，CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同，需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞：
（1）取 10～60 万细胞，重悬于 0.5mL 细胞培养液中，细胞培养液中可以含血清和酚红。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
（3）在孵育期间，按照每 1mL JC-1 染色缓冲液（5×）加入 4mL 蒸馏水的比例，配制适量的JC-1 染色缓冲液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育结束后，600g 4 ℃离心3 ～4 分钟，沉淀细胞。弃上清，注意尽量不要吸除细胞。
（5）用JC-1 染色缓冲液（1×）洗涤 2 次：加入 1mL JC-1 染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g 4 ℃离心3～4 分钟，沉淀细胞，弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g 4 ℃离心 3～4 分钟，沉淀细胞，弃上清。
（6）再用适量 JC-1 染色缓冲液（1×）重悬后，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察，也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
包涵体溶解液50ml实验方法注意事项
（1）本试剂只适用于实验，不适用于临床检测；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙锭）有毒性，能通过皮肤吸收，对眼睛有刺激作用，使用时需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。在处理和标记时，尽可能在暗处进行。在孵育阶段，用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后，在暗室内用显微镜观察；
（4）整个操作过程动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞，尽量在4℃下操作，以免影响细胞状态。
（5）在细胞洗涤的后一步，请尽量将上清弃净，以免PBS残留，有可能会影响实验结果。
（6）为防止荧光衰变，宜在1小时内进行流式检测。
（7）PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高，建议首*行Annexin V-FITC染色，短可在上机前5分钟再加入PI染色。
成纤维细胞生长因子

大鼠肠静脉内皮细胞*培养基 100mL

IL2RG Others Rat 大鼠 IL2RG / CD132 人细胞裂解液 (阳性对照)

SUP-B15人Ph+急淋白血病细胞系 SUP-B15 acute lymphoblastic leukemia cell line Ph+ IMDM培养基(GIBCO)+20%FBS

人心脏成纤维细胞HCF

293FT(人胚肾细胞) 5×106cells/瓶×2 支气管成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
多聚赖氨酸10 mg/mlPLL

CRELD2 Others Mouse 小鼠 CRELD2 人细胞裂解液 (阳性对照)

白介素-2转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3/VP16-IL-2

杂交瘤(B类);Z172A4C4C6F3G12 Burkitt's 淋巴瘤细胞，Raji细胞 HBZY-1细胞，大鼠肾小球系膜细胞EC(HBZY-1)

UM-UC-3, 人膀胱移行细胞癌 Human

LILRB3 Others Human 人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 人细胞裂解液 (阳性对照)
TNFRSF4 Others Mouse 小鼠 TNFRSF4 / OX40 / CD134 人细胞裂解液 (阳性对照)

人羊膜细胞;WISH

HeLa 229 人细胞

EA.hy926人脐静脉细胞融合细胞 EA.hy926 human umbilical vein cell fusion cells DMEM培养基+10%FBS

TNFSF9 Protein Mouse 重组小鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (His 标签)

大鼠条纹神经元(RNs)(1×106) C6, 大鼠脑胶质瘤细胞 Rattus
大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

人神经营养因子3(NT-3)免疫试剂盒 Human Neurotrophin-3,NT-3 ELISA KIT

Mousegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit小鼠生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA试剂盒规格：96T/48T

通用型南芥菜花叶病毒(ArabisMosaicVirus;ArMV)基因检测试剂盒20次

Humanmelanocyteantibody,MCAbELISA试剂盒人黑色素细胞抗体(MCAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Humanplacentalprotein，PPELISAKit人胎盘蛋白(PP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人载脂蛋白E(Apo-E)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human TNF related activation induced cytokine (TRANCE) ELISA Kit 人坏死因子相关激活诱导因子(TRANCE)ELISA试剂盒

Humaninterferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit 人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanInhibin,INHELISA试剂盒人抑制素(INH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

组织基质金属蛋白酶(MMP-7)活性荧光定量检测试剂盒20次

HumanLeptinReceptor,LEPRELISAKit人瘦素受体(LEPR)ELISA试剂盒规格：96T/48T
包涵体溶解液50ml实验方法大鼠二胺氧化酶（DAO）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠多巴胺转运蛋白(DAT)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠多巴胺D2受体(D2R)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

我司包涵体溶解液50ml实验方法本着标准*、质量*、服务*、信誉*的宗旨，为客户提供轻松便捷，安全可靠的网上采购模式！我们将竭诚为您服务,咨询！