Aprotinin 5mg实验方法 返回列表页

Aprotinin 5mg实验方法使用注意事项
1．微量试剂取用前请离心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿*、戴手套等。
4．本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不*用于检测组织样本。
Aprotinin 5mg实验方法操作方法
1．悬浮细胞离心（2000rpm离心5min）收集；贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次（2000rpm离心5min）收集1~5×105细胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混匀；室温、避光、反应5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞；
4．请在1 hour内，进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A．荧光显微镜观察
1．滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞；
2．对于贴壁细胞来说，也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡；
（1）将细胞于盖玻片上生长，用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，并设立阴性对照组；
（2）用PBS洗涤细胞两次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混匀；
（4）将上述溶液滴加于盖玻片表面，使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖；
（5）避光、室温反应5 min。
3．将盖玻片倒置于载玻片上，于荧光显微镜下观察激发波长546nm，发射波长647 nm，7-AAD荧光信号呈红色。
B．流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测，激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
Aprotinin 5mg实验方法实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2％的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时，注意必须*清除EDTA：在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤，清除EDTA，以免残余的EDTA与Ca2＋螯合，影响Annexin V的结合。
（1）用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer；
（2）细胞收集。悬浮细胞收集：离心5分钟；贴壁细胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化时间不宜过长，否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合），于室温2000rpm离心5～10分钟，收集细胞；
（3）细胞洗涤：用预冷1×PBS（4℃）重悬细胞一次，2000rpm离心5～10分钟，洗涤细胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞；
（5）Annexin V-FITC标记：加入5μL的Annexin V-FITC混匀后，避光，室温孵育15分钟；
（6）PI标记：上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
（7）上机前，补加200μL的1×Binding Buffer。
FGF19 Protein Human 重组人 FGF19 蛋白

大鼠肝窦内皮细胞*培养基 100mL

CDH17 Others Rat 大鼠 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 人细胞裂解液 (阳性对照)

293T/17人胚肾细胞 Human embryonic kidney cell line 293T/17 DMEM+10%FBS

人淋巴内皮细胞HLEC

BEL-7405(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人真皮成纤维母细胞-新生HDF-n
CM-M023小鼠淋巴管内皮细胞*培养基100mL

CPA2 Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase A2 / CPA2 人细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠肾上皮细胞*培养基 100mL

97H人肝癌细胞 97H human hepatocarcinoma cells DMEM+10%FBS

IL27 Protein Human 重组人 IL27 / Interleukin-27 蛋白 (His 标签)

TT(人甲状腺导管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-H838 [H838](人肺癌细胞)
CD99 Others Rat 大鼠 CD99 人细胞裂解液 (阳性对照)

人胰腺癌细胞;PANC-1

人子宫平滑肌细胞*培养基 100mL

C127细胞，小鼠细胞 Y1(肾上腺皮质细胞) 人胚肺成纤维细胞;MRC-5

CCL14 Protein Human 重组人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 标签)

RKO(人结肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠骨钙素(OC)ELISA试剂盒 ，英文名： OC ELISA Kit

人神经肽Y(NP-Y)ELISA检测试剂盒HumanneuropeptideY,NP-YELISAKit 96T/48T

大鼠酸性成纤维细胞生长因子(aFGF/FGF-1)免疫试剂盒 Rat acidic fibroblast growth factor,aFGF/FGF-1 ELISA Kit

英文名称RatEpithelialneutrophilactivatingpeptide-78ELISAKit大鼠上皮中性粒细胞活化肽(ENA-78)规格：96T/48T

环境无机磷/游离磷酸根离子比色法定量检测试剂盒20次

ELISAKitTI-Ag人胸腺非依赖性抗原规格：48T/96T
人孕酮受体(PGR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human tumor vascular endothelial growth factor (TAF) ELISA Kit 人血管生长因子(TAF)ELISA试剂盒

HumanBH3interactingdomaindeathagonist,BidELISAKit 人BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Humaninsulin-likegrowthfactors2,IGF-2ELISA试剂盒人胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

组织己糖激酶(HEXOKINASE)酶偶联反应比色法定量检测试剂盒20次

HumanLDL-ICELISAKit人低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Aprotinin 5mg实验方法大鼠促上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠促甲状腺素释放激素(TRH)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠促甲状腺激素(TSH)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装