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原钒酸钠溶液(NaVO4,0.1M)(预活化)100ml使用说明书使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿*、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不*用于检测组织样本。
原钒酸钠溶液(NaVO4,0.1M)(预活化)100ml使用说明书操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
原钒酸钠溶液(NaVO4,0.1M)(预活化)100ml使用说明书实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时,注意必须*清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
FGF18 Protein Mouse 重组小鼠 FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 标签)
大鼠肠上皮细胞*培养基 100mL
TNFRSF17 Others Rat 大鼠 TNFRSF17 / BCMA 人细胞裂解液 (阳性对照)
V79仓鼠肺细胞 V79 hamster lung cells RPMI-1640(GIBCO)+20%FBS
人脑微血管内皮细胞HBMEC
Calu-6(人肺退行性癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人前列腺微血管内皮细胞HPrMEC
人食道平滑肌细胞cDNAHESMC cDNA
COLEC10 Others Cynomolgus 食蟹猴 COLEC10 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B1
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B2 *-EDTA(含100mL酶解缓冲液) 10mL
MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞 Human
PLA2G2A Others Human 人 PLA2G2A / PLA2B 人细胞裂解液 (阳性对照)
GDNF Others Rat 大鼠 GDNF 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人永生化淋巴细胞;CNLMG-B5537LC
CL-0347HCC38(人导管癌细胞)5×106cells/瓶×2
COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维细胞 人癌细胞,MCF7细胞 PT67(小鼠逆转录病毒包装细胞)
人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;C918
OSMR Others Human 人 OSMR / IL31RB 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)ELISA试剂盒 ,英文名: APAF1 ELISA Kit
人神经丝蛋白(NF)ELISA检测试剂盒Humanneurofilamentprotein,NFELISAKit 96T/48T
大鼠*Ⅻ(FⅫ)免疫试剂盒 Rat coagulation factor Ⅻ,FⅫ ELISA Kit
英文名称RatThyroidAbELISAKit大鼠甲状腺素抗体(ThyroidAb)规格:96T/48T
酵母单酚氧化酶(monophenolase)活性比色法定量检测试剂盒20次
ELISAKitDNase-Ⅰ人脱氧核糖核酸酶Ⅰ规格:48T/96T
人游离原卟啉(FEP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human recombination activating gene 2 (RAG-2) ELISA Kit 人重组激活基因2(RAG-2)ELISA试剂盒
HumanCarcinoembryonicFerritin,CEFELISAKit 人癌胚铁蛋白(CEF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanintegrin-linkedkinase1,ILK-1ELISA试剂盒人整合素连接激酶1(ILK-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织甲戊二羟酸激酶(mevalonatekinase)活性比色法定量检测试剂盒20次
HumanLactateDehydrogenase,LDHELISAKit人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
原钒酸钠溶液(NaVO4,0.1M)(预活化)100ml使用说明书大鼠交联物(PY)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠膀胱抗原(BTA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠半胱酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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