48T/96T 大鼠丙氨酸氨基转移酶（ALT）elisa试剂盒

选择ELISA试剂盒应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。
产品名称：大鼠丙氨酸氨基转移酶(ALT)elisa试剂盒
英文名称：Rat Alanine aminotransferase,ALT ELISA Kit
规格：48T/96T
保存： 2-8℃（频繁使用时）；-20℃（长时间不用时）。
有效期： 6 个月(4℃)；12 个月（-20℃）。
用途： 用于体外定量分析人血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液
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具有如下优点：
一、高效、灵敏、特异的抗体；
二、稳定的重复性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；
五、性价比非常好，节省实验经费。
试剂配制：
1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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注意事项：
1加样：
①实验样本过多时，可分批次操作，以减少实验时间延长造成的误差；
②加酶试剂后，用吸水纸吸干孔外试剂；
③作定量试验时，使用加样器加注试剂，并经常校正其准确性，此外，要做到一份样本一个移液头，防止交叉污染。
2.温育：
①如有两种温度，尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件；
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察；
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”，因此尽量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板时，拍板时要垂直，避免交叉污染，用力不能过猛，防止抗原抗体复合物脱离；
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅，若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出；
③为了洗涤效果好，实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法，在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次，或适当增加洗板的次数；
4.显色：
ELISA试剂盒中，如以四甲基联苯胺(TMB)为底物，则提供的底物为A和B两瓶应用液；如以邻苯二胺(OPD)为底物，则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂，要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光，但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定：
读取结果要在15-30 min内完成，定性测定用肉眼判读试验结果时，反应板应水平距离白色背景10-15 cm；定量测定时用酶标仪读取结果，酶标仪不应置于阳光或强光照射下，需先预热15-30 min再进行测试。
细胞色素P450家族成员3A4(CYP3A4)(酶联免疫吸附试验法)　98%　植物乳杆菌　250mg

天冬氨酸转氨酶2(AST2)(酶联免疫吸附试验法)　98%　炭球菌　5g

核氧化还原蛋白(NXN)(酶联免疫吸附试验法)　98%　固氮假单胞菌　1g

视网膜劈裂蛋白(RS)(酶联免疫吸附试验法)　98%　酿酒酵母　5g

胆固醇-25-羟化酶(CH25H)(酶联免疫吸附试验法)　97%　地衣芽孢杆菌　1g

胱硫醚β合酶(CβS)(酶联免疫吸附试验法)　98%　粪产碱杆菌　1g

再生胰岛衍生蛋白3α(REG3α)(酶联免疫吸附试验法)　98%　大肠埃希氏菌(大肠杆菌)*　1g

MARCKS相关蛋白(MARCKSL1)(酶联免疫吸附试验法)　98%　芽胞杆菌　250mg

L1-细胞粘附分子(L1CAM)(酶联免疫吸附试验法)　98%　格氏糖多孢菌　5g

唾液酸结合Ig样凝集素10(SIGLEC10)(酶联免疫吸附试验法)　97%　白僵菌　25g

二肽基肽酶9(DPP9)(酶联免疫吸附试验法)　97%　枯草芽孢杆菌　5g

二肽基肽酶8(DPP8)(酶联免疫吸附试验法)　≥98%　酿酒酵母　5MG

囊泡乙酰胆碱转运蛋白(VAChT)(酶联免疫吸附试验法)　96%　酿酒酵母　1g

核因子κB(NFκB)(酶联免疫吸附试验法)　96%　塔宾曲霉　250mg

分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)(酶联免疫吸附试验法)　98%　微黄大洋芽孢杆菌　1g

弹性蛋白酶2B(ELA2B)(酶联免疫吸附试验法)　98%　戈登氏菌属　5g

血管生成素1(ANGPT1)(酶联免疫吸附试验法)　98%　灰树花2号　1g

血小板反应蛋白解整合素金属肽酶9(ADAMTS9)(酶联免疫吸附试验法)　98%　马赛菌　25g
大鼠丙氨酸氨基转移酶(ALT)elisa试剂盒冰冻切片黑色素（MELANIN）染色　SDCCAG3(Serologically defined colon cancer antigen 3) 　20 ul

细胞黑色素（MELANIN）染色　NR3C1(Glucocorticoid receptor) 　100 ul

石蜡切片黑色素去色　PTMA(Prothymosin alpha) 　20 ul

冰冻切片黑色素去色　DSCR6(Protein ripply3) 　1 Kit

石蜡切片网硬蛋白（RETICULIN）染色　CYP2C9(Cytochrome P450 2C9) 　100 ul

冰冻切片网硬蛋白（RETICULIN）染色　FCGBP(IgGFc-binding protein) 　100 ul

石蜡切片透明质酸染色　LY6G6F(Lymphocyte antigen 6 complex locus protein G6f) 　20 ul

冰冻切片透明质酸染色　HLA-E(HLA class I histocompatibility antigen, alpha chain E) 　100 ul

细胞糖原高酸希尔（PAS）法染色　PIBF(Progesterone-induced-blocking factor) 　100 ul

石蜡切片糖原淀粉酶（DIASTASE）法染色　PYY2(Putative peptide YY-2) 　100 ul

冰冻切片糖原淀粉酶（DIASTASE）法染色　RPRM(Protein reprimo) 　20 ul

石蜡切片胆色素普歇（Pouchet）染色　KLHL17(Kelch-like protein 17) 　100 ul

冰冻切片胆色素普歇（Pouchet）染色　ARHGAP21(Rho GTPase-activating protein 21) 　100 ul

石蜡切片胆色素霍尔（Hall）染色　FNDC5(Fibronectin type III domain-containing protein 5) 　100 ul

冰冻切片胆色素霍尔（Hall）染色　ITGAL(Integrin alpha-L) 　20 ul

石蜡切片胆色素史汀（Stein）染色　CLEC4E(C-type lectin domain family 4 member E) 　100 ul
操作流程如下：
（1）仅用于科研待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。