选择ELISA试剂盒应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。
产品名称:大鼠抗胰蛋白酶(AT)elisa试剂盒
英文名称:Rat Anti-trypsin,AT ELISA Kit
规格:48T/96T
保存: 2-8℃(频繁使用时);-20℃(长时间不用时)。
有效期: 6 个月(4℃);12 个月(-20℃)。
用途: 用于体外定量分析人血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液
具有如下优点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、性价比非常好,节省实验经费。
试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事项:
1加样:
①实验样本过多时,可分批次操作,以减少实验时间延长造成的误差;
②加酶试剂后,用吸水纸吸干孔外试剂;
③作定量试验时,使用加样器加注试剂,并经常校正其准确性,此外,要做到一份样本一个移液头,防止交叉污染。
2.温育:
①如有两种温度,尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件;
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察;
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”,因此尽量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板时,拍板时要垂直,避免交叉污染,用力不能过猛,防止抗原抗体复合物脱离;
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅,若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出;
③为了洗涤效果好,实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法,在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次,或适当增加洗板的次数;
4.显色:
ELISA试剂盒中,如以四甲基联苯胺(TMB)为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以邻苯二胺(OPD)为底物,则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂,要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光,但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定:
读取结果要在15-30 min内完成,定性测定用肉眼判读试验结果时,反应板应水平距离白色背景10-15 cm;定量测定时用酶标仪读取结果,酶标仪不应置于阳光或强光照射下,需先预热15-30 min再进行测试。
人骨保护素配体(OPGL) Kit,48T/96T 拉丁属名: Lysinibacillus sphaericus 号: 5390-04-5
小鼠骨保护素配体(OPGL) Kit,48T/96T 拉丁属名: Candida parapsilosis 号: 5390-04-5
大鼠骨保护素配体(OPGL) Kit,48T/96T 拉丁属名: Penicillium polonicum 号: 53910-25-1
人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF) Kit,48T/96T 拉丁属名: Staphylococcus lentus 号: 5392-28-9
小鼠乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF) Kit,48T/96T 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用 号: 5392-28-9
大鼠乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF) Kit,48T/96T 拉丁属名: Lactobacillus plantarum 号: 53924-05-3
人抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA) Kit,48T/96T 拉丁属名: Aspergillus ruber 号: 53924-05-3
小鼠抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA) Kit,48T/96T 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用 号: 53924-05-3
大鼠抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA) Kit,48T/96T 拉丁属名: Mucor fumosus 号: 5392-67-6
人碳酸酐酶2(CA-2) Kit,48T/96T 拉丁属名: Streptococcus thermophilus 号: 539-32-2
小鼠碳酸酐酶2(CA-2) Kit,48T/96T 拉丁属名: Aquibacillus halophilus 号: 539-32-2
大鼠碳酸酐酶2(CA-2) Kit,48T/96T 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用 号: 53939-30-3
人抗糖蛋白抗体(GP) Kit,48T/96T 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用 号: 53939-30-3
兔抗糖蛋白抗体(GP) Kit,48T/96T 拉丁属名: Brevundimonas vesicularis 号: 5394-23-0
人色素上皮衍生因子(PEDF) Kit,48T/96T 拉丁属名: Aspergillus tamarii 号: 5394-63-8
假蜜环菌(亮菌)小鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒
黑管孔菌小鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒
小马勃5-1小鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒
蝉花1-10小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒
石耳小鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒
*土豆口蘑小鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA试剂盒
菊叶点霉小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒
猕猴桃细菌性溃疡病小鼠催产素(OT)ELISA试剂盒
核果链核盘菌小鼠Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)ELISA试剂盒
交链孢小鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA试剂盒
康氏木霉小鼠神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒
薄花边伞8-3小鼠神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒
灰葡萄孢菌小鼠神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒
总状毛霉小鼠骨保护素(OPG)ELISA试剂盒
镰刀菌属小鼠B因子(BF)ELISA试剂盒
灰青霉小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒
四孢菇小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒
杆菌状链霉菌小鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒
炭疽刺盘孢菌小鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISA试剂盒
大鼠抗胰蛋白酶(AT)elisa试剂盒人糖皮质激素受体β(GR-β)免疫试剂盒几丁质酶结构域蛋白1抗体BrdU标记法细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒3-氨基-9-乙基咔唑 95%小鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒,人糖皮质激素受体α(GR-α)免疫试剂盒嵌合蛋白2/β2-chimaerin抗体BrdU标记法载玻片细胞繁殖NBT显色检测试剂盒N-(2-乙酰胺基)-2-亚氨基二乙酸 BC,99%小鼠抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA试剂盒,人糖磷脂酰肌(GPI)免疫试剂盒几丁质酶1抗体BrdU标记法载玻片细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒2,2′-联氨-双(3-乙基并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐 98%小鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒,人糖类抗原72-4(CA72-4)免疫试剂盒白细胞抗原CD97 alpha 抗体BrdU标记法组织冰冻切片细胞繁殖NBT显色检测试剂盒化乙酰胆碱 99%小鼠游离睾(F-TESTO)ELISA试剂盒,人糖类抗原50(CA50)免疫试剂盒紧密连接蛋白2抗体BrdU标记法组织冰冻切片细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒化乙酰胆碱 for cell culture,≥99大鼠白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒,人糖类抗原19-9(CA19-9)免疫试剂盒紧密连接蛋白7抗体BrdU标记法组织石蜡切片细胞繁殖NBT显色检测试剂盒N-α-甲酰-DL-精氨酰-4-胺盐酸盐 98%L-丙-谷二肽人糖类抗原125(CA125)免疫试剂盒2号染色体开放阅读框53抗体BrdU标记法组织石蜡切片细胞繁殖荧光显微镜检测试剂盒二(2-羟乙基)亚氨基三(羟甲基) 99%丹参酚酸A Salvianolic acid A人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)免疫试剂盒2号染色体开放阅读框54抗体C. albicans RFLP基因分析试剂盒1,3-二[三(羟甲基)甲氨基]烷 99%β-倒捻子素 β-Mangostin
操作流程如下:
(1)仅用于科研待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。