公司专注于细胞培养及细胞销售的细胞生物学技术研发的高科技企业,主要拥有复苏及冻存细胞及相关技术服务,公司主要为细胞生命科学研究人员提供有效的、人小细胞肺癌细胞;NCI-H446
技术培训、售后服务,其细胞主要来源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等细胞库,以及部分国内外细胞研究机构建系。
细胞名称 人小细胞肺癌细胞;NCI-H446
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁/悬浮生长,混合
特征特性 该细胞是1982年由Carney D和Gazdar AF等从一位小细胞肺癌患者的胸腔积液中建立的。细胞的原始形态并不具有小细胞肺癌特征。这个细胞株是小细胞肺癌的生化和形态学上的变种,表达神经元*的烯醇酶和脑型肌酸激酶同工酶;*脱羧酶、蚕素、抗利尿激素、催产素或胃泌激素释放肽未达到可检测水平。与正常细胞相比,该细胞c-myc DNA序列扩增约20倍,RNA增加15倍。Z初传代培养基用含有5%FBS的RPMI1640,另外添加10 nM、0.005 mg/ml胰岛素、0.01 mg/ml转铁
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清,10%
传代方法 1:2。3天内可长满。
传代情况 P(87+5)
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 B类人小细胞肺癌细胞;NCI-H446
处理方法
1、用75%的酒精消毒(建议配制75%酒精的水是经过灭菌处理的)培养瓶外部。
2、肉眼观察培养基,若出现浑浊情况,请及时。
3、将细胞置于显微镜下观察,如有污染,请及时。
4、严格无菌操作,拆下封口膜,如果细胞的量较少,可放置温箱中继续培养。如果细胞量足够,可进行离心收集细胞,用1×PBS洗两遍,加入新鲜培养液后置于37℃,5%CO 2的培养箱中继续培养。若细胞密度达到80%以上或存在成团现象,建议用0.25%*消化后传代培养。
5、如果细胞为冻存状态,可将其继续放入液氮中继续保存。也可将其放入37℃的水浴中不时摇动,尽快解冻。解冻后,用75%酒精将冻存管擦拭干净,用吸管吸出细胞悬液,放入培养瓶中,再加入相应的细胞培养液,放于37℃培养箱中继续培养。
细胞培养知识:
1.应如何避免细胞污染?
细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室 环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养 基配制是减低污染之方法。
2.如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?
直接灭菌后丢弃之。
3.购买之细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?
研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少, 大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性 损伤, 以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可。
4.购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?
研究人员在细胞培养时出现存活率不佳, 常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用 错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于-80℃太久。
5.收到之冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?
冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血 钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
GIDRP88 生长抑制和分化相关蛋白抗体H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原
Gas1 生长休止特定蛋白1抗体H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原
MDFIC 肌原调节抑制蛋白抗体Haase(hyaluronidase) 透明质酸酶/*抗原
MEI-1 减数分裂缺陷蛋白1抗体HA tag HA tag标签多肽
MTBP/MDM2BP 双微体2癌基因结合蛋白抗体HA tag(map) HA tag标签(分支多肽)
NIRF/RNF107 环指蛋白107抗体HAI-1(Hepatocyte Growth Factor Activator Inhibitor 1) 肝细胞生长因子激活物抑制因子抗原
Necdin 生长抑制蛋白NDN抗体HBA1(hemoglobin alpha 1) 人类血红蛋白α1抗原
RPRD1A/P15RS 细胞周期依赖性激酶抑制相关蛋白抗体VWCE/URG11(von Willebrand factor C and EGF domain-coaining) 乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗原
PCNP PEST含核蛋白抗体URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation) 乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗原
PLK4/STK18 */*蛋白激酶18URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation)C terminal 肝炎病毒X蛋白(HBxAg)C端抗原
Quiescin Q6/QSOX1 巯基氧化酶1抗体Beta-HCG (Human chorionic gonadotropin Beta) 人beta 亚基人绒毛膜*抗原
LEU5/RFP2 白血病相关蛋白5抗体Alpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha ) 人α亚基人绒毛膜*多肽抗原
SAPK3/MAPK12 应激活化蛋白激酶3抗体(丝裂原活化蛋白激酶12)HCFHrp/BTA(Bladdertumor aigen)human 膀胱肿瘤抗原
SCGB3A1 结合珠蛋白家族3A1抗体CD36L1/SRB1 peptide 高密度脂蛋白受体/清道夫受体抗原
SEI2/SERTAD2 调控周期蛋白依赖蛋白激酶SEI2抗体HER2 receptor()(erbB-2 isoform 2 receptor N-Terminus) c-erbB-2受体抗体(N端)
SIPA1 信号诱导增殖相关蛋白1抗体HER2 receptor()(erbB-2 isoform 2 receptor N-Terminus) c-erbB-2受体抗原(N端)
AGER 晚期糖基化终末产物特异性受体抗体HGF(hepatocyte growth factor) 肝细胞生长因子抗原
Fast skeletal Myosin/MRLC2 骨骼肌肌球蛋白轻链2抗体HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人类疱疹病毒8抗原
TFDP3 转录因子DP3抗体(肝癌相关抗原661)HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人类疱疹病毒8抗原
BMP1 骨形态发生蛋白1/胶原C蛋白肽链内切酶抗体HHV8/ORF K2(Human herpesvirus 8 type P) 人类疱疹病毒8抗原
SMARCA2/BRM ATP依赖解旋酶SMARCA2抗体HIF-1 Beta/AR1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta) 缺氧诱导因子1β 抗原
Ferritin Light Chain 铁蛋白轻链抗体HIF-2 Alpha (Hypoxia-inducible factor-2 Alpha) 缺氧诱导因子2α 抗原
CECR5 猫眼综合征染色体候选基因5抗体Histone H1b(Histone H1.4) 组蛋白H1b抗原
CEE 跨膜结构域边缘蛋白CEE抗体HDAC1/HD1(histone deacetylase 1) 组织蛋白去乙酰化酶1抗原
CESK1 分子伴侣CESK1蛋白抗体Flag-Tag (CT) Flag Tag标签多肽
CHCHD2 丙型肝炎NS2反式调节蛋白/衰老相关的基因10蛋白抗体DYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag 标签DYKDDDDK Tag分支肽
CHKL/Ethanolamine kinase beta 乙醇胺激酶β抗体T7 tag(recombina T7-tagged proteins) T7 tag标签抗原
CHORDC1 含半*和*丰富域蛋白1抗体V5 tag(recombina V5-tagged protein) V5 tag多肽抗原
HIV2 gp36 人类免疫缺陷病毒2型抗体(艾滋病病毒)KT3 tag KT3 tag标签抗原
phospho-CDK5(Tyr15) 磷酸化周期素依赖性激酶5抗体VSV-G tag(vesicular stomatitis virus glycoprotein) VSV-G tag标签抗原
MRC2/CD280 巨噬细胞甘露糖受体2抗体HLA-DR(human leukoyte Aigen DR) HLA-DR抗原
Tetranectin/CLEC3B/TNA 四连接素TN抗体HLA-E 人类白细胞抗原E
CLLD8/SETDB2 组蛋白H3-K9甲基转移酶抗体Ai-HMGA1 (high mobility group AT-hook 1) 高迁移率族蛋白A1抗原
FbxO6 F-box蛋白相关蛋白6抗体HMGA2 (high mobility group A2) 高迁移率族蛋白A2抗原
C3c/Compleme fragme 3c 补体片段C3c抗体HO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1) 血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗原
phospho-PI3 Kinase p110 beta(Ser1070) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)抗体HO-1/HSP32(Hemeo xygenase 1) 血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗原
phospho-PP2A alpha(Tyr307) 磷酸化蛋白磷酸酶2A(PP2Aα)抗体HO-2(Heme oxygenase 2) 血红素氧合酶-2抗原
phospho-PP2A alpha/beta(Tyr119) 磷酸化蛋白磷酸酶2A(PP2Aα)抗体phospho-HP1/heterochromatin protein 1 (pTyr24)(fruit fly) 异染色质蛋白1(磷酸化多肽)
phospho-eIF4EBP1(Thr36) 磷酸化4E结合蛋白1抗体phospho-heterochromatin protein 1 (pTyr41)peptide 异染色质蛋白1(磷酸化多肽)
phospho-eIF4EBP1/2/3(Thr36) 磷酸化4E结合蛋白1,2,3抗体HPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16) 人类状瘤病毒16抗原
PI3 Kinase p110 beta 磷脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)抗体HPV18 E6 人类状瘤病毒18E6
SNX27 SNX27蛋白抗体HPV16-E7/E7 protein(Human papillomavirus type 16) 人类状瘤病毒16抗原
TRPV4/TRP12 瞬时受体电位蛋白12抗体Hpt/HP(haptoglobin) 结合珠蛋白/触珠蛋白抗原
TH/T-H glycoprotein TH糖蛋白抗体H-ras/Ras/Ras p21 peptide 原癌基因H-ras抗原
UHRF1 核蛋白95抗体HSTF2/HSF2 peptide 热休克转录因子2抗原
PPP4C */*蛋白磷酸酶4C抗体BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 癌耐药相关蛋白(抗原)
GNLY/NKG5 颗粒溶素抗体Hrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3) HRAS样抑制因子3抗原
Tuftsin 促吞噬肽抗体HSP47(Heat shock protein-47) 热休克蛋白-47抗原