T25m2 人肾管状上皮细胞操作

我公司提供原代细胞、细胞系、细胞株和菌种，细胞库管理规范，提供的细胞株背景清楚，提供参考文献和*培养条件。纯度可达 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

人肾管状上皮细胞【Human Renal: Renal Tubular Epithelial Cells】产品描述：提供的原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据国际标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时保证质量的稳定。在生物技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基；2、说明书及注意事项；3、售后服务标准。
保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。
细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞处理方法：
以下细胞处理方法及细胞说明书仅供参考，具体操作还需要根据到货时细胞密度，细胞生长状态等具体情况，酌情处理，如需要更详细技术指导，请及时电话或邮件联系。
一．贴壁细胞
客户接收到细胞，用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）培养瓶外部。
肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张）。
显微镜观察细胞，当细胞融汇至80%左右（可以传代的情况下），细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度，培养瓶应预留一部分培养基继续培养。
严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
1000rpm,5min离心，重悬细胞。换新的细胞培养瓶，37℃,5%CO2  培养。
二．悬浮细胞
1. 接收到细胞，用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）培养瓶外部。
2. 肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张）。
3. 严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4. 将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒）。
5. 1000rpm,5min离心，重悬细胞。 换新的细胞培养瓶和新鲜培养基，37℃,5%CO2  培养细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。
Humahrombihrombomodulincompound,T-TM 人凝血酶血栓调节蛋白复合物(T-TM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 肉桂醛 HPLC≥98% 20mg

Humahrombihrombomodulincompound,T-TM人凝血酶血栓调节蛋白复合物(T-TM)ELISA试剂盒规格：96T/48T 肉桂酸 HPLC≥98% 20mg

Humahrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFI 人纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 瑞枯灵 HPLC≥98% 20mg

Humahrombopoietin，TPO人血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒规格：96T/48T 瑞香素 HPLC≥98% 20mg

Humahrombospondin1,TSP-1 人血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 噻嗪二酮 HPLC≥98% 5mg

HumahromboxaneA2,TX-A2 人血栓素A2(TX-A2)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 噻嗪二酮苷 HPLC≥98% 5mg

HumahromboxaneA2,TX-A2人血栓素A2(TX-A2)ELISA试剂盒规格：96T/48T 赛门苷I HPLC≥98% 20mg

Humahrombusprecursorprotein,TpP人血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 三白草酮 HPLC≥98% 20mg

Humahymicsomallymphopoietin,TSLP人胸腺基质细胞生成素(TSLP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 三尖杉碱 HPLC≥98% 20mg

Humahymidinephosphorylase,TP人胸腺嘧啶核苷0酸化酶(TP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 三尖杉宁碱 HPLC≥98% 20mg
小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA检测试剂盒MouseGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactor,GM-CSFELISAKit 96T/48T 盐酸金刚烷胺（标准品）  Amantadine HCl  质量规格：HPLC>98%,标准品

人胱抑素B(CSTB/CST6/STFB)试剂盒 Human Cystatin-B,CSTB/CST6/STFB ELISA kit 硫酸阿米卡星,硫酸丁胺卡那霉素  Amikacin Sulfate   质量规格：含量674-786ug /mg,USP30

RatEpithelialneuophilactivatingpeptide78,ENA-78ELISAKit大鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA试剂盒规格：96T/48T 硫酸阿米卡星(标准品)  Amikacin Sulfate   质量规格：效价测定

5-HT高效液相色谱电化学定量检测试剂盒20 两性霉素B  Amphotericin B  质量规格：>750ug /mg,USP,细胞培养级

mousefollicle-stimulatinghormone,FSHELISA试剂盒小鼠促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒规格：96T/48T 两性霉素B(标准品)  Amphotericin B  质量规格：含量测定

小鼠脱氧核糖核酸酶Ⅰ样2(DNASE1L2)ELISA试剂盒 ，英文名： DNASE1L2 ELISA Kit 醋酸增血压素  Angiotensin Acetate  质量规格：>98%,BR

兔6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA检测试剂盒Rabbit6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit 96T/48T 阿那曲唑  Anastrozole  质量规格：度> 99%,BR，可用于细胞培养

牛肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ(CPT-Ⅰ)试剂盒 Bovine carnitine palmitoylansferase I,CPT-Ⅰ ELISA kit 阿那曲唑(标准品)  Anastrozole  质量规格：HPLC>98%,标准品

英文名称HumanSDF-1—Somalcellderivedfactor1ELISAkit人基质衍生因子-1B(SDF-1β)ELISAkit规格：96T/48T 硫酸安普霉素，硫酸阿布拉霉素  Apramycin sulfate  质量规格：>500U/mg,BR

动物骨DNA萃取试剂盒20 硫酸安普霉素(标准品)  Apramycin sulfate  质量规格：含量测定
人肾管状上皮细胞操作Ratmaixmetalloproteinase9/GelatinaseB,MMP-9ELISA试剂盒大鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乳糖酸(>98%,BC)  Lactobionic acid  质量规格：>98%,BC

Ratmajorbasicprotein,MBPELISAKit大鼠主要碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乳糖；α-乳糖,一水  alpha-Lactose, monohydrate  质量规格：BR

Ratmajorbasicprotein,MBPELISA试剂盒大鼠主要碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乳酸链球菌素;乳链菌肽;尼生素  Nisin  质量规格：BR,效价>900IU/MG

RatmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/AgBⅠ/H-1ⅠELISAKit大鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乳酸环丙沙星  Ciprofloxacin lactate  质量规格：美国进口

RatmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/AgBⅠ/H-1ⅠELISA试剂盒大鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乳酸钙五水(>98%,USP)  Calcium (L)-lactate, pentahydrate  质量规格：>98%,USP

RatmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/AgBⅡ/H-1ⅡELISAKit大鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乳清酸  Orotic acid  质量规格：>98%(T),BR

RatmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/AgBⅡ/H-1ⅡELISA试剂盒大鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA试剂盒规格：96T/48T 乳果糖（标准品）  Lactulose  质量规格：含量测定

RatmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/AgBⅢ/H-1ⅢELISAKit大鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISA试剂盒规格：96T/48T 肉桂油  Cinnamon oil  质量规格：工业级

RatmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/AgBⅢ/H-1ⅢELISA试剂盒大鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)ELISA试剂盒规格：96T/48T 肉桂酰胺(>98%，BR)  Cinnamamide  质量规格：>98%，BR

Ratmalondialchehyche,MDAELISAKit大鼠二(MDA)ELISA试剂盒规格：96T/48T 肉桂酸肉桂醇酯 HPLC≥98% 5mg