注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
产品名称 | 小鼠肺大动脉内皮细胞说明 |
规格 | T25m2 |
货号 | CS-963787 |
小鼠肺大动脉内皮细胞【Mouse Lung: Normal Artery Endothelial Cells】产品描述:提供的原代细胞均来自新鲜组织,用于培养该细胞的组织采集是根据国际标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞的污染,同时保证质量的稳定。在生物技术部标准的操作流程下,原代细胞可以保持分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。提供的细胞有标准的鉴定流程,保证细胞的纯度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基;2、说明书及注意事项;3、售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
收到冻存细胞的处理方法:
1.37°C水浴预热培养基;
2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻(解冻后不要继续暖细胞);
3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞,1000rpm离心5min;
4.弃上清,加入5ml培养基重悬细胞后转入T25培养瓶中,轻轻晃匀;
5.置于37°C,5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话,瓶盖不要拧太紧);
6.第二天,用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
Rat soluble tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand (sAIL) ELISA Kit 大鼠可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sAIL)ELISA试剂盒 木糖苷儿茶酚 HPLC≥98% 5mg
Rat soluble vascular cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 大鼠可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA试剂盒 羟基豨莶精醇 HPLC≥98% 5mg
Rat somal cell derived factor 1 beta (SDF-1 beta /CXCL12) ELISA Kit 大鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒 氧代beta谷甾醇 HPLC≥98% 5mg
Rat somal cell derived factor 1A (SDF-1a/CXCL12) ELISA Kit 大鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA试剂盒 氧代扁柏脂素 HPLC≥98% 5mg
Rat stem cell factor / mast cell growth factor (SCF/MGF) ELISA Kit 大鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒 乙酸,二羟基双氢黄酮酯 HPLC≥98% 5mg
Rat stem cell factor receptor (SCFR) ELISA Kit 大鼠干细胞因子受体(SCFR)ELISA试剂盒 异戊烯氧基gamma花椒碱 HPLC≥98% 5mg
Rat tarate resista acid phosphatase 5b (ACP-5b) ELISA Kit 大鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA试剂盒 (),异海松二烯,二醇 HPLC≥98% 5mg
Rat telomerase (TE) ELISA Kit 大鼠端粒酶(TE)ELISA试剂盒 羟基荜澄茄烯酮 HPLC≥98% 5mg
Rat terminal compleme complex C5b-9 (TCC C5b-9) ELISA Kit 大鼠末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA试剂盒 Alfa铁杉脂素 HPLC≥98% 5mg
Rat testoterone ELISA Kit (T) 大鼠(T)ELISA试剂盒 Alpha菠菜甾酮 HPLC≥98% 5mg
小鼠瘦素(LEP)ELISA检测试剂盒MouseLeptin,LEPELISAkit 96T/48T 伏立康唑 Voriconazole 质量规格:>99%,BR
人骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)试剂盒 Human Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA Kit 伏立康唑(标准品) Voriconazole 质量规格:HPLC>99%,标准品
RatFractalkine/CX3CL1ELISAKit大鼠趋化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA试剂盒规格:96T/48T 伏立诺他 Vorinostat/SAHA 质量规格:>99%,可用于细胞培养
AKT蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25 伏立诺他(标准品) Vorinostat/SAHA 质量规格:HPLC>98%,标准品
MouseGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISA试剂盒小鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 醋酸阿基瑞林 Argireline Acetate 质量规格:>98%,BR
小鼠糖抗原125(CA125)ELISA试剂盒 ,英文名: CA125 ELISA Kit L-甲状腺素/左旋甲状腺素 Levothyroxine 质量规格:>98,BR
豚鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA检测试剂盒GuineaPigIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAkit 96T/48T 腺嘌呤 Adenine 质量规格:>98%,BR
牛卵泡抑素(FST)试剂盒 Bovine Follistatin,FST ELISA kit 腺嘌呤(标准品) Adenine 质量规格:HPLC>98%,标准品
英文名称HumanErythropoietinELISAKit人红细胞生成素(EPO)ELISAKit规格:96T/48T 琥乙红霉素 Erythromycin ethylsuccinate 质量规格:potency>765 µg of erythromycin (C37H67NO13) per mg,USP35
动物糖蛋白刀豆蛋白A(ConA)树脂法化试剂盒5 布洛芬 Ibuprofen 质量规格:>99%,BP/USP
小鼠肺大动脉内皮细胞说明Residues of rat and bovine serum albumin detection ELISA Kit 大鼠的牛血清白蛋白残留检测ELISA试剂盒 羟甲烟胺(标准品) N-(Hydroxymethyl)nicotinamide 质量规格:含量测定
R-G细胞活力和凋亡检测试剂盒100 羟达沙替尼 Hydroxymethyl Dasatinib 质量规格:美国进口
R-G细胞活力和凋亡检测试剂盒50 羟基紫檀茋 HPLC≥98% 20mg
RhoA鸟苷酸酶活性分析试剂盒6 羟基原人参二醇 HPLC≥98% 10mg
RhoB鸟苷酸酶活性分析试剂盒6 羟基芫花素 HPLC≥98% 20mg
RhoC鸟苷酸酶活性分析试剂盒6 羟基羽扇豆鹼 HPLC≥95% 20mg
RHODAMINE110蛋白标记试剂盒3(200微克/) 羟基异亮氨酸 HPLC≥98% 20mg
RHO蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25 羟基异补骨脂酚 HPLC≥95% 20mg
RHO蛋白共沉淀分析试剂盒5 羟基乙酰氧基甲氧基黄酮 HPLC≥98% 5mg
Ricinuscommunisagglinin,RCAELISAKit蓖麻凝集素(RCA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 羟基乙酰氧基黄酮 HPLC≥98% 5mg